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目的研究铅对仔鼠海马和大鼠胶质瘤C6细胞中酸敏感离子通道（acid-sensingionchannel,ASIC）1a、2a和2b mRNA和蛋白表达的影响,探讨铅神经毒作用的分子机制,为铅中毒的防制工作提供理论依据。方法1.铅对仔鼠生长发育及海马组织中ASIC1a、2a和2b表达的影响孕鼠随机分为去离子水对照组、0.2%和1.0%醋酸铅（Pb（Ac）2）组,自孕第0d起以自由饮水染铅。幼鼠出生后,记录各组仔鼠数以及体重和身长。之后经哺乳染铅,断乳后则自行饮用与其母鼠浓度相同的含铅水。出生后（PN）8d和50d分别处死仔鼠,原子吸收光谱法测定脑铅含量,RT-PCR和Western blot法分别观察各组仔鼠海马中ASIC1a、2a和2b的mRNA和蛋白的表达情况。2.铅对C6细胞损伤和对细胞内ASIC1a、2a和2b表达的影响正常培养大鼠胶质瘤C6细胞,按0.5μmol/L、5μmol/L、50μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L Pb（Ac）2组和生理盐水对照组,以MTT实验观察铅对C6细胞存活率的影响,LDH释放实验观察铅对C6细胞的损伤作用;之后按5μmol/L、50μmol/L、1000μmol/L Pb（Ac）2组和生理盐水对照组染毒细胞24h,以流式细胞术检测铅致细胞凋亡情况,Real-time PCR和RT-PCR方法检测各组细胞中ASIC1a、2a和2b的mRNA表达水平,RT-PCR方法检测各组细胞中蛋白激酶C（PKC）和钙调蛋白（CaM）的mRNA表达水平,Western blot检测细胞中ASIC1a、2a、2b、PKC、CaM的蛋白表达水平。结果1.铅对仔鼠生长发育和海马组织中ASIC1a、2a和2b表达的影响（1）各组间仔鼠数量比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,对照组、0.2%和1.0%Pb（Ac）2组仔鼠的体重和身长逐渐降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。（2）0.2%、1.0%Pb（Ac）2组PN 8d和50d仔鼠的脑铅含量均高于相应对照组,差异具有统计学意义（P＜0.01）;同剂量组仔鼠PN50d脑铅含量高于PN 8d（P＜0.01）。（3）PN 8d和PN50d的1.0%Pb（Ac）2组仔鼠海马的ASIC1a mRNA相对表达量高于对照组（P＜0.01）,0.2%和1.0%Pb（Ac）2组仔鼠海马ASIC1a蛋白相对表达量均低于相应的对照组（P＜0.01,P＜0.05）;PN 8d和PN 50d的0.2%、1.0%Pb（Ac）2组仔鼠海马ASIC2a、ASIC2b的mRNA和蛋白相对表达量与相应对照组比较,差异均没有统计学意义（P＞0.05）。上述结果均由三次独立实验证明。2.铅对C6细胞的损伤作用和对细胞内ASIC1a、2a和2b表达的影响（1）MTT结果显示,细胞存活率随染铅剂量的增加而降低（P＜0.01）;LDH释放率随染铅剂量的增加而增加（P＜0.01）;细胞凋亡率有随剂量增加的趋势,但与对照组的差异没有统计学意义（P＞0.05）。（2）1000μmol/L Pb（Ac）2组ASIC1a mRNA的表达较对照组升高（P＜0.01）;各剂量组ASIC2a和ASIC2b mRNA表达水平与对照组相比,差异均无统计学意义（P＞0.05）;50μmol/L和1000μmol/LPb（Ac）2组C6细胞的ASIC1a蛋白表达较对照组降低（P＜0.01）,并呈随染铅剂量增加而降低的趋势;铅不影响ASIC2a和ASIC2b蛋白的表达（P＞0.05）。（3）自5μmol/L Pb（Ac）2组开始,PKC和CaM mRNA和蛋白表达水平随剂量增加而降低（P＜0.05,P＜0.01）。结论1.动物实验显示,对孕哺乳期母鼠染铅,仔鼠的生长发育受到影响,且铅可以在仔鼠的脑部蓄积,并改变不同发育时期仔鼠海马部位的ASIC1a mRNA和蛋白表达水平。结合前期行为学实验结果,ASIC1a表达改变可能是铅产生神经毒性的机制之一。2.细胞实验显示,铅对大鼠胶质瘤C6细胞具有毒性作用,使细胞增殖活力下降,细胞膜受损;同时铅干扰C6细胞中ASIC1a的mRNA和蛋白表达水平,证实了动物实验的结论。3.铅对CNS ASICs表达的影响具有-1a亚基特异性。4.PKC/CaM-ASICs途径可能构成了一条新的铅神经毒作用通路。综上所述,本研究经体内体外实验相互佐证,从mRNA和蛋白水平上探讨了铅对ASICs的影响,证实铅对ASIC1a表达的选择性干扰作用是铅神经毒性的可能机制之一,对于铅中毒的防治具有重要的指导意义。