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目的本实验通过建立兔颈总动脉-颈内静脉内瘘模型,观察血管组织学结构的变化及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达,探讨西罗莫司在局部血管外膜涂层后缓慢释放药性对血管内膜增生情况的影响及可能的作用机制。方法健康雄性新西兰大耳白兔18只,质量2.2±0.1kg,将大白兔按随机数字表法分成对照组、F-127组和F-127+西罗莫司组,每组6只。将兔颈总动脉与颈内静脉端端吻合,成功建立动静脉内瘘模型后,按组别在吻合口处给予不同处理:对照组,吻合口及周围不给于任何处理;F-127组,在吻合口周围及近吻合口处静脉外膜涂抹20%pluronic F-127多聚凝胶0.5ml;F-127+西罗莫司组,在吻合口周围及近吻合口处静脉外膜涂抹携带西罗莫司0.5mg的20%pluronic F-127多聚凝胶0.5ml。术后3周,获取近吻合口处静脉血管,采用苏木素-伊红染色法观察静脉内膜增生情况,计算机图像分析系统测量静脉血管内膜厚度,采用免疫组织化学染色法及Western blotting方法检测各组血管组织中TGF-β1及CTGF的表达情况。采用SPSSl3.0统计软件系统对实验数据进行分析,所得数据以均数±标准差((?)±s)表示。采用单因素方差分析,若组间比较有统计学差异,以LSD法行两两比较,检验水准α=0.05。P<0.05为差异有统计学意义。结果1、成功构建兔颈总动脉-颈内静脉内瘘模型。2、术后3周,组织形态学观察对照组、F-127组较F-127+西罗莫司组血管内膜明显增厚,可见明显平滑肌细胞增生;内膜厚度比较发现对照组、F-127组较F-127+西罗莫司组具有统计学差异(P<0.05),对照组、F-127组之间无统计学差异(P>0.05)。3、TGF-β1免疫组织化学表达:术后3周,TGF-β1主要在细胞胞浆内表达,对照组、F-127组血管内膜、中膜、外膜均可见明显TGF-β1表达,呈棕黄色;F-127+西罗莫司组在内膜、中膜、外膜均可见少量TGF-β1表达。4、CTGF免疫组织化学表达:术后3周,CTGF主要在细胞胞浆内表达,对照组、F-127组内膜内皮细胞处与外膜可见大量CTGF表达,呈棕黄色,中膜处表达较少;F-127+西罗莫司组内膜内皮细胞处与外膜可见少量表达。5、TGF-β1及CTGF的表达统计学分析发现对照组、F-127组较F-127+西罗莫司组表达明显升高(P<0.05),对照组、F-127组之间无统计学差异(P>0.05)。6、Western blotting结果显示三组均可见不同程度的TGF-β1及CTGF蛋白表达,其中对照组、F-127组较F-127+西罗莫司组表达明显升高(P<0.05),对照组、F-127组之间无统计学差异(P>0.05)。结论1、兔颈部颈总动脉与颈内静脉吻合可模拟人体动静脉内瘘模型。2、西罗莫司血管外膜涂层缓释的方法可抑制内瘘血管内膜的增生。3、西罗莫司可能通过调控血管组织中TGF-β1及CTGF的表达水平来抑制血管内膜纤维化过程。4、血管增生过程是血管外膜、中膜、内膜共同作用的结果。