CARDS TX与HMGB1-TLRs-MyD88信号通路关系在MPP中的研究

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目的:研究肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿肺泡灌洗液(Broncho alveolar lavage fluid,BALF)中 CARDS TX 的临床意义,以及CARDS TX与HMGB1-TLRs-MyD88的相关性,探索MP感染的免疫发病机制。方法:1.选取2018年1月至2019年06月期间在苏州大学附属儿童医院住院治疗,确诊为MPP并行支气管镜检查的患儿66例为MPP组,按BALF中MP的载量不同分为高MP组33例和低MP组33例;同期因支气管异物行支气管镜的儿童20例作为对照组。用RT-qPCR法检测CARDS TX、HMGB1的表达量,分析比较组间患儿的临床特征、实验室检查及CARDS TX、HMGB1的相关性。2.选取4~7岁MPP患儿20例、支气管异物儿童10例,用ELISA法检测TNF-α、IL-1β,RT-qPCR法检测RAGE、TLR2、TLR4、MyD88、TLR6、CD14等表达量,分析 CARDS TX 与 HMGB1 及其受体、TNF-α、IL-1β、MyD88、CD14 等的相关性。3.采用RT-qPCR法检测不同浓度CARDS TX刺激下不同时间THP-1细胞中HMGB1、TLR2、TLR4的表达量,并分析其相关性。结果:1.高MP组患儿热程、热峰比低MP组更长、更高,且高MP组发生胸腔积液、肺实变、肺不张的比例更高。低MP组WBC计数的平均值高于高MP组及对照组;高MP组和低MP组NE、CRP高于对照组,且高MP组CRP更高;高MP组LYM、EOS 低于低 MP 组、对照组。高 MP 组 CD19+CD23+、CD3+、CD3+CD4+、CD3-CD(16+56)+、CD3-CD19+均低于低 MP 组。MPP 组 CARDS TX 的表达量高于对照组,且高MP组更高。2.MPP 组 HMGB1、TLR2、MyD88、CD14 的表达量高于对照组,且 CARDS TX与 HMGB1、TLR2、MyD88、CD14 呈正相关,HMGB1 亦与 TLR2、MyD88、CD14呈正相关。3.相同CARDS TX浓度刺激下,HMGB1、TLR2、TLR4在72小时的表达量均达高峰,后逐渐下降。同一时间下,HMGB1、TLR2、TLR4表达量与CARDSTX的刺激浓度呈正相关。结论:1.MPP的病情轻重与MP载量、CARDS TX表达量有关,高载量患儿炎症反应更重,细胞免疫功能紊乱更明显。2.CARDS TX可能通过HMGB1-TLRs/CD14-MyD88途径参与MPP的免疫发病机制。
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