目的:通过建立动物模型,探讨不同范围子宫切除术对卵巢卵泡发育、细胞形态及细胞凋亡的影响,探讨子宫切除术对卵巢功能的影响机制,为指导临床选择恰当的手术方式提供依据。方法:1实验动物模型建立及取材:将36只成年雌性同龄新西兰兔,随机分为三组,每组12只,分别为:对照组(A组),三角形子宫切除组(B组),全子宫切除组(C组)。实验动物造模时按组别分别行不同范围子宫切除术,A组常规开腹后,暴露子宫卵巢半小时,不做任何操作,然后关腹。所有实验兔术后饲养4个月,经阴道脱落细胞涂片确定动情周期后,均于动情前期取材。取材时,将实验兔麻醉固定,入腹腔探查到双侧卵巢并切除。左侧卵巢离体后,立即切取靠近骨盆漏斗韧带处部分组织,切成1×1×4mm~3组织块,放入4%戊二醛溶液固定,电镜备用。其余左侧卵巢组织以70%乙醇溶液固定,待流式细胞检测用。右侧卵巢,以甲醛溶液固定,光镜备用。2各项指标的测定方法:将用70%乙醇溶液固定的卵巢标本,制成单分散细胞悬液,采用流式细胞仪检测卵巢细胞凋亡率。将用甲醛溶液固定好的右侧卵巢行常规梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋、切片,并以HE染色,光镜观察。左侧部分卵巢组织经固定包埋制成透射电镜样品,经半薄切片定位后,电镜下观察卵巢颗粒细胞超微结构。计量资料结果以(均数±标准差)表示,所有数据运用SPSS13.0版统计软件处理,进行t检验、单因素方差分析。检验水准a=0.05,以P＜0.05时认为差异显著,具有统计学意义。结果:1卵巢组织凋亡率检测结果经流式细胞检测技术测定,并经单因素方差分析证实:全子宫切除组卵巢细胞凋亡率(22.48±5.13%)明显高于正常对照组(6.91±3.48%),差异有统计学意义(P＜0.05)。全子宫切除组卵巢细胞凋亡率明显高于三角形子宫切除组(7.20±3.18%),差异有统计学意义(P＜0.05)。三角形子宫切除组和正常对照组间差异无统计学意义(P＞0.05)。2电镜下观察颗粒细胞形态及超微结构A组(对照组):颗粒细胞相互比邻排列,形态正常自然,细胞核和细胞基质密度均匀。细胞呈不规则椭圆形,核大,染色淡,核呈圆形或椭圆形,有1-2个网状核仁。胞浆中细胞器丰富,线粒体嵴呈管状,排列规则,结构正常。胞浆中可见较多脂滴。细胞连接紧密,与卵母细胞相邻的颗粒细胞可见较多突起伸入到透明带中。B组(三角形子宫切除组):电镜下表现基本同A组。C组(全子宫切除组):颗粒细胞浆中各种细胞器数量少。线粒体嵴呈板状,嵴数量少,结构模糊不清。粗面内质网轻度扩张。胞质内可见较多空泡,局部胞质水肿,核膜局部缺损,核周间隙轻度扩张,也可见局部颗粒细胞膜缺损。核周局部水肿,电子致密度低。细胞间窦状间隙宽。颗粒细胞与透明带间距离较大,突起少。3光镜下观卵巢组织及卵泡发育情况A组(对照组):卵巢皮质浅表部有大量原始卵泡。皮质中可见较多不同发育期的卵泡,包括窦前卵泡、窦状卵泡及囊状卵泡和成熟卵泡,多数生长卵泡卵母细胞较大,核染色质细粒状,可见网状核仁。卵泡形态规则,大小各异,有窦腔形成。不少卵泡内清晰可见卵泡腔、卵泡液和卵丘。皮质内也可见部分黄体和间质结构,有闭锁卵泡。B组(三角形子宫切除组):光镜下表现基本同A组。C组(全子宫切除组):卵巢皮质内卵泡总数少,各级生长卵泡和成熟卵泡数量尤其少,闭锁卵泡多见。多数卵泡形态不规则,卵母细胞内可见核偏位、固缩,透明带塌陷,颗粒细胞及卵泡膜细胞松散、萎缩并脱落进入卵泡腔内。卵巢组织中可见较多间质组织纤维化改变。结论:1全子宫切除术后,卵巢细胞凋亡加剧。2全子宫切除术后,部分卵巢颗粒细胞发生形态改变及细胞器结构受损,颗粒细胞出现一系列细胞凋亡表现。3全子宫切除术后,所保留卵巢组织中卵泡发育障碍,且卵巢组织发生一系列缺血缺氧改变。4三角形子宫切除术对卵巢组织及其颗粒细胞形态影响不明显。卵巢组织及细胞形态的改变可能是子宫切除术后卵巢功能缺失的组织形态学基础。临床应充分考虑手术范围,严格掌握手术指征。