目的筛选放射工作人员转录组差异表达基因并寻找关键基因,探讨该基因在长期低剂量电离辐射导致人支气管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)中的机制。方法1.用RNA-seq转录组学检测某单位放射工作人员血液样本,生物信息学分析RNA-seq结果,筛选差异表达mRNA并用实时荧光PCR进行验证。2.用X射线辐照仪对人支气管上皮细胞(16HBE)进行多次照射,单次照射剂量为0.5Gy,累积剂量为2Gy。3.照射后的细胞用免疫荧光实验、划痕实验、细胞粘附性实验和CCK-8活性实验来验证是否发生EMT。4.用Western Blot实验验证FN1蛋白在不同累积剂量细胞中的表达情况,判断FN1是否可作为电离辐射诱发人正常支气管上皮细胞发生EMT的生物标志物。结果1.转录组结果显示,一共有873个mRNA表达有显著差异,其中68个表达上调,805个表达下调。差异表达基因大多与上皮间质转化(EMT)、免疫反应和细胞迁移等生物过程相关。2.人支气管上皮细胞(16HBE)随着累积剂量的增加,钙粘连蛋白(E-cad)表达逐渐降低,波形蛋白(Vimentin)逐渐增高。细胞迁移能力增强,粘附率降低,初步形成EMT。3.Western Blot实验结果发现,随着累积剂量的增加,FN1在细胞内表达逐渐升高。结论本课题对放射工作人员血样进行高通量测序和分析,筛选放射工作人员和暴露工作人员的差异mRNA表达谱。支气管上皮细胞照射,建立电离辐射诱导发生EMT,发现FN1蛋白可以作为辐射诱发EMT新的生物标志物。