【摘 要】
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本论文研究了菌酶协同发酵豆粕（bacterium enzyme synergistic fermented soybean meal）替代饲料中不同比例鱼粉对大口黑鲈（Micropterus salmoides）生长性能、血清生化指标、抗氧化性能、消化酶活性、肝脏和肠道组织结构、肠道菌群的影响。具体研究内容和主要结果如下:1.菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长性能、组织生化指标的影响试验选取4
【基金项目】
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广东省促进经济高质量发展专项资金海洋经济发展项目（GD0E[2019]A22号）；
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本论文研究了菌酶协同发酵豆粕（bacterium enzyme synergistic fermented soybean meal）替代饲料中不同比例鱼粉对大口黑鲈（Micropterus salmoides）生长性能、血清生化指标、抗氧化性能、消化酶活性、肝脏和肠道组织结构、肠道菌群的影响。具体研究内容和主要结果如下:1.菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长性能、组织生化指标的影响试验选取450尾初始体质量5.08±0.01g的大口黑鲈,随机分为6组,分别投喂基础饲料和用菌酶协同发酵豆粕替代10%、20%、30%、40%鱼粉的饲料以及用豆粕替代30%鱼粉的饲料,记为T0、T10、T20、T30、T40和NC30,室内循环水系统养殖57d。饲养试验结束后,称重计算生长性能指标,取全鱼测定体成分,采集血液样品用于分析血清生化指标。结果表示,除T10组外,各替代组大口黑鲈特定生长率、蛋白质效率和蛋白质沉积率显著低于T0组（P＜0.05）,饲料系数显著高于T0组（P＜0.05）。与T0组相比,T40组和NC30组大口黑鲈增重率显著降低（P＜0.05）,NC30组大口黑鲈成活率显著降低（P＜0.05）。菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉显著影响大口黑鲈形体指标、体成分、脂质代谢指标和免疫抗氧化能力（P＜0.05）。结果表明,在适宜的替代比例范围内,显著提高血清谷草转氨酶、超氧化物歧化酶活性;菌酶协同发酵豆粕等蛋白替代鱼粉对大口黑鲈存活率没有显著影响。替代水平超过30%时,显著降低大口黑鲈终末体质量和增重率。2.菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈消化酶活性、组织结构的影响上述饲养试验结束后,采集胃、肠道、肝脏样品测定其消化酶活性,采用石蜡切片、H.E染色分析中肠、肝脏组织结构。结果显示,菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈胃蛋白酶、胃淀粉酶、肠道淀粉酶、肝脂肪酶活性影响不显著（P＞0.05）,但显著提高肠道胰蛋白酶和脂肪酶活性（P＜0.05）,显著降低胃脂肪酶活性（P＜0.05）;除T20组外,各组肝脏蛋白酶和肝脏淀粉酶活性差异不显著（P＞0.05）。大口黑鲈中肠绒毛高度、肌层厚度随菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉水平增加而呈现下降趋势,其中T10组中肠绒毛高度显著高于T30组（P＜0.05）,T10组中肠肌层厚度显著高于T40组（P＜0.05）。各组大口黑鲈肝脏均出现大量胞质空泡化的肝细胞,其中T20、T40未见明显炎症,T0、T10、T30组局部血管周围可见少量炎性细胞灶性浸润,NC30部血管周围可见较多炎性细胞浸润。结果表明,菌酶协同发酵豆替代鱼粉比豆粕直接替代鱼粉效果更好,能有效减少肠道炎症发生。3.菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肠道菌群的影响上述饲养试验结束后,活体解剖,取大口黑鲈后肠肠道用于肠道菌群分析。通过OTU分析、相对丰度分析,结果显示,T10、T40与T0组Chao指数和Ace指数不存在显著性差异（P＞0.05）,表明菌酶协同发酵豆粕对大口黑鲈肠道菌群丰富度无显著影响;NC30组Chao指数显著低于T0组（P＜0.05）,表明豆粕对大口黑鲈肠道菌群丰富度有显著影响。Shannon指数随着菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉水平的提高而逐渐降低,其中T40组显著低于T0组（P＜0.05）,表明菌酶协同发酵豆粕对大口黑鲈肠道菌群多样性有显著影响;同时T0组Shannon指数最高,表明T0组肠道菌群多样性最复杂。在门水平上,肠道菌群主要以变形菌门（Proteobacteria）、软壁菌门（Tenericutes）、梭杆菌门（Fusobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）为主,各组4个门所占的比例均在95%以上,其中菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对变形菌门、梭杆菌门、厚壁菌门相对丰度影响不显著（P＞0.05）,但显著提高软壁菌门的相对丰度（P＜0.05）。在属水平上,丰度较高的几个属分别为支原体（Mycoplasma）、鲸杆菌属（Cetobacterium）、邻单胞菌属（Plesiomonas）、气单胞菌属（Aeromonas）,其中菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉对鲸杆菌属、邻单胞菌属、气单胞菌属的相对丰度影响不显著（P＞0.05）,但显著提高支原体的相对丰度（P＜0.05）。综上所述,菌酶协同发酵豆粕替代鱼粉显著影响大口黑鲈的生长性能、组织生化指标、消化酶活性、中肠和肝脏组织结构、肠道菌群。建议替代比例不宜超过30%。
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