猪细小病毒病是由猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)感染引起的,本病主要可导致初产母猪的繁殖障碍,表现为流产、死胎及木乃伊胎。PPV作为一种主要的猪病病原严重束缚了养猪业的健康发展。本实验室分离到PPV-BQ株,分子生物学分析证实该毒株与经典强毒株Kresse株同源性较高,同源率达到99.4%;VP2基因及编码蛋白的序列比对结果表明PPV-BQ株与Kresse株编码氨基酸序列完全一致。本次试验选择PPV-BQ株人工感染初孕母猪,试验选用4头11月龄PPV阴性杜洛克初孕母猪,妊娠日龄为35天,随机分为2组,即健康对照组和PPV攻毒组,每组2头。攻毒组于第1天接种PPV-BQ株细胞培养毒10mL(TCID50=107/mL);健康对照组接种RPMI 1640培养液10mL,接种途径为口服加静脉。所有母猪在接种后40天处死,无菌取出母猪体内的胎猪,以及母猪和胎猪的主要脏器。根据PPV NS-1基因设计了一对特异性引物,建立了检测PPV的实时荧光定量PCR方法,对该毒株在感染母猪及其胎猪的体内组织的病毒载量进行测定,进而对病毒的组织分布情况进行分析。采集母猪及其胎猪的主要脏器制成病理切片,HE染色,光学显微镜下观察,对猪体的组织病理学变化进行观测。结果如下:1.怀孕母猪的剖检结果显示,对照组母猪的各组织无可见的病理损伤,其子宫内胎猪外观形态正常,亦无可见的病理损伤;攻毒组母猪子宫出现肉眼可见的子宫内膜炎症,子宫内胎猪出现木乃伊胎和溶胎现象。2.病毒组织分布结果显示,对照组母猪及胎猪脏器中均未检出PPV病毒。攻毒组母猪的心脏、脾脏、肺脏、肾脏和子宫中检出PPV病毒,以子宫内病毒含量最高,可达到1012拷贝。攻毒组胎猪仅在心脏、脾脏和肺脏中检出了PPV病毒。3.组织病理学检测结果显示,对照组母猪及其体内胎猪各脏器均未发现明显的组织病理学损伤;攻毒组母猪的肺脏出现细支气管性肺炎,脾脏出现淋巴细胞减少,心脏、肝脏、肾脏、扁桃体和腹部淋巴结未见明显的组织病理学变化;攻毒组胎猪所检脏器未见明显的组织病理学变化。本试验证实PPV-BQ株可以感染初孕母猪,通过建立PPV实时荧光定量PCR方法检测了PPV在母猪及胎猪脏器中的病毒载量,对病毒的组织分布情况进行了分析,并对相应脏器进行了病理组织学观察,从器官、分子水平上探讨了PPV-BQ株感染初孕母猪及其胎猪的病毒组织分布和组织病理学变化;为猪细小病毒病的后续研究奠定了理论及实践基础。