【摘 要】
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碱性物质的分离是常规反相色谱面临的难点之一,这是由于碱性物质与硅胶基质固定相之间容易产生不可逆的吸附,导致较难洗脱、峰展宽或者柱容量降低,重现性变差。生物胺是一类
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碱性物质的分离是常规反相色谱面临的难点之一,这是由于碱性物质与硅胶基质固定相之间容易产生不可逆的吸附,导致较难洗脱、峰展宽或者柱容量降低,重现性变差。生物胺是一类生物活性含氮碱性化合物,往往存在于肉类制品、水产品和其他发酵食品的腐坏和发酵过程中,当人体摄取量累积达到一定程度时将产生协同效应增强毒性,损伤神经、心血管系统甚至危及生命,因此其痕量残留分析十分必要。毛细管电色谱(CEC)具有高柱效、高选择性的特点,易于采用选择性固定相,以及和高灵敏度的检测技术联用,是一种高效的微分离技术。本文拟发展适合于生物胺等某些碱性物质分离分析的毛细管电色谱技术,通过制备具有多重作用的新型离子液体功能化聚合物整体柱,或者联用灵敏的激光诱导荧光检测技术,提高碱性物质分离检测能力,并进行食品分析应用。论文包括以下三部分:1、概述毛细管电色谱原理及其相关技术,阐述了激光诱导荧光检测技术原理、毛细管色谱柱类型,以及点击反应、离子液体等在聚合物整体柱功能化中的应用,提出论文的选题依据和研究重点。2、采用毛细管电色谱-激光诱导荧光检测技术(CEC-LIF)建立了食品中生物胺毒素的高灵敏分析方法。以4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑(NBD-F)为高效衍生试剂,建立了主要生物胺的快速荧光修饰方法;优化了分离条件,六种生物胺15 min内快速分离,线性范围宽达4个数量级,检出限(S/N=3)为0.1~1L0ng/mL。方法预处理简单、样品和溶剂用量少,应用于加工和发酵食品中生物胺测定,结果与HPLC方法无显著性差异,且在检测限、选择性和分析速度方面具有优势。3、以十八烷基硫醇和1-烯丙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体为有机单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,加入三元致孔剂、引发剂偶氮二异丁腈,通过一步巯-烯点击化学联合自由基聚合反应合成了聚(C18-co-EDMA-co-IL)整体柱。实验优化了单体组成、致孔剂和交联剂比例和温度等制备条件,表征了柱的形貌、孔径、稳定性、溶胀性及机械性能。该整体柱具有反相色谱特征,同时咪唑型离子液体功能基还能提供多重相互作用以及产生可调的较强电渗流,可满足碱性化合物和中性化合物等不同类型的快速分离要求,日内和日间RSD分别小于1.6%和2.5%,分离烷基苯柱效大于87000 N/m。
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