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目的通过检测2型糖尿病伴/不伴动脉粥样硬化患者血清及粥样硬化斑块中脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(adipocyte fatty-acid binding protein A-FABP)的含量及表达,探讨A-FABP在糖尿病及其大血管病变的发生、发展中所起的作用,为进一步研究A-FABP与2型糖尿病及大血管病变发生、发展的分子生物学机制提供理论基础。方法实验一:糖尿病组:选取聊城市人民医院2009年8月至2010年8月住院的2型糖尿病患者69例,均符合1999年世界卫生组织(world health organization WHO)正式公布的糖尿病诊断与分型标准,男37例,女32例,年龄31～77岁,病程2个月～21年。根据有无动脉粥样硬化并发症分为单纯2型糖尿病组(A组)和2型糖尿病合并动脉粥样硬化组(B组),其中A组32例,男17例,女15例,年龄31～68岁,平均年龄52.0±9.6岁,病程2个月～16年,平均病程9.1±2.4年。B组37例,男20例,女17例,年龄34～77岁,平均年龄50.4±11.3岁,病程3～21年,平均病程10.2±2.1年。单纯动脉粥样硬化组(C组):选取同期在我院住院的动脉粥样硬化无糖尿病患者43例,男22例,女21例,年龄34～71岁,平均年龄52.8±10.5岁,病程3个月～22年,平均病程9.4±3.1年。正常对照组(D组):正常健康人组选取同期在我院健康查体人员31例,其中男16人,女15人,年龄32～58岁,平均年龄48.0±5.9岁。所有研究对象均用ELISA法检测血清中A-FABP含量。实验二:2型糖尿病伴动脉粥样硬化组(E组):选取聊城市人民医院2009年1月至2010年10月住院的2型糖尿病伴颈动脉粥样硬化患者行颈动脉内膜切除手术(carotid endarterectomy CEA)获得的含动脉内膜的粥样硬化斑块或截肢手术所切除之中动脉粥样硬化斑块血管51例,男28例,女23例,年龄36～79岁,平均年龄57.2±12.2岁,病程2年～23年,平均病程16.9±4.6年,均符合1999年WHO正式公布的糖尿病诊断与分型标准。单纯动脉粥样硬化组(F组):选取我院同期住院非糖尿病颈动脉粥样硬化患者行CEA术所切除之含动脉内膜的动脉粥样硬化斑块共30例,男16例,女14例,年龄38～80岁,平均年龄58.9±12.9岁,病程4个月～26年,平均病程18.1±5.7年。上述标本由两位病理学专家以双盲法进行病理学分期:Ⅰ期脂纹期,Ⅱ期纤维斑块期,Ⅲ期粥样斑块期,Ⅳ期复合性病变期。其中E组Ⅰ期9例,男5例,女4例,年龄37～79岁,平均年龄61.3±13.5岁。Ⅱ期10例,男5例,女5例,年龄38～77岁,平均年龄56.2±11.3岁。Ⅲ期12例,男7例,女5例,年龄36～72岁,平均年龄53.9±15.1岁。Ⅳ期20例,男11例,女9例,年龄46～76岁,平均年龄57.8±10.2岁。F组30例均为Ⅳ期。对照组(G组):选取我院同期因外伤行截肢术所切除之正常血管10例,男5例,女5例,年龄35～69岁,平均年龄56.8±11.7岁。应用两步法免疫组织化学方法对每组标本中的A-FABP表达进行检测。每张切片随机选取高倍镜(400×)下5个视野记数细胞,以阳性细胞百分率作为A-FABP标记指数(label index LI)。所有统计学处理均使用SPSS13.O软件处理。结果实验一单纯2型糖尿病组(A组)、2型糖尿病合并动脉粥样硬化组(B组)、单纯动脉粥样硬化组(C组)血清A-FABP水平与正常对照组(D组)比较均升高。两两比较后其中B组最高,C组比A组高。(均有P<0.01)实验二1.动脉内膜组织学变化:对照组(G组)为正常动脉其内膜表面光滑,内膜无浸润性增厚。动脉粥样硬化(E组、F组)动脉各期病变内膜均呈不同程度的浸润性增厚,斑块内含有大量增生的平滑肌细胞、泡沫细胞、巨噬细胞及胶原纤维。2.免疫组织化学染色:对照组(G组)正常动脉内膜中,2型糖尿病合并动脉粥样硬化组(E组)动脉内膜及斑块中,单纯动脉粥样硬化组(F组)动脉内膜及斑块中均可见抗A-FABP免疫复合物呈棕褐色颗粒表达在泡沫细胞、巨噬细胞胞浆中。但表达量不同,E组Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期抗A-FABP免疫复合物阳性细胞百分率均较G组升高(P<0.01),E组四期两两比较均有显著性差异(P<0.01),随着病变的加重,抗A-FABP免疫复合物阳性细胞百分率增加,F组Ⅳ期抗A-FABP免疫复合物阳性细胞百分率与E组Ⅳ期比较无差异性(P﹥0.05)。结论1.2型糖尿病患者血清中A-FABP水平较正常人升高,2型糖尿病合并动脉粥样硬化患者比单纯动脉粥样硬化患者血清A-FABP水平升高,说明血清A-FABP水平与糖代谢紊乱有关,可能在2型糖尿病发生过程中起一定作用。2.动脉粥样硬化患者血清中A-FABP水平较正常人升高,提示血清A-FABP水平与动脉粥样硬化有关,可能参与了动脉粥样硬化的发生与发展。3.在2型糖尿病合并动脉粥样硬化患者的动脉斑块中发现了A-FABP表达,A-FABP的表达量在动脉粥样硬化斑块及内膜中较正常动脉内膜中明显增加,提示A-FABP参与了动脉粥样硬化斑块的形成;随着病变的加重,斑块的稳定性也越来越差,A-FABP表达也明显增多,表示斑块中A-FABP量与动脉粥样硬化严重程度及斑块的稳定性有关。4.2型糖尿病合并动脉粥样硬化组与单纯动脉粥样硬化组同一时期Ⅳ期斑块A-FA BP表达量无明显差异性,显示糖代谢紊乱本身影响了动脉粥样硬化的发生快慢,而未加重A-FABP在动脉粥样硬化斑块中的表达。