超声波对蛋白质盐析的作用研究

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超声波在生物技术中的应用,是一个比较新的热点研究领域。超声波作用的物理机制主要包括机械传质作用、加热作用和空化作用。在生物技术方面,超声波可应用于酶工程、发酵工程、细胞工程以及肿瘤的生物治疗中[3]。盐析是一个古老的分离方法,1894年Harnmarstein[4]用硫酸铵首次从牛血清中分离出牛血清白蛋白。超声波在促进盐析方面的应用研究,还未见报道。蛋白质决定生命存在和运动的最重要的一类物质,它是由氨基酸聚合而成的高分子聚合物,可以说蛋白质是由氨基酸串起来的“项链”。所有的氨基酸都至少含有两个功能基团——出现在α碳上的一个氨基和一个羧基。对水溶性的蛋白质来说,它的水溶液是亲水性胶体。蛋白质之所以能悬溶于水中,形成稳定的胶体溶液,与其分子状态有关。蛋白质分子表面带有亲水性基团,它们很容易进行水合作用,并在表面形成一层水化层,从而使它们能顺利的进入水溶液中。另外,如果溶液的pH值偏离于等电点,所有分子都带有相同的电荷,又会进一步增进它们的分散能力。因此,凡是能破坏蛋白质分子水化作用或者减弱分子间同性相斥作用的因子,都有可能降低蛋白质在水中的溶解度,而使它沉淀下来。超声波对蛋白质盐析的影响因素比较多,一方面受到声学因素的影响,如声强、频率、辐照时间等,另一方面又受到蛋白质盐析体系性质的影响,如密度等。本文通过试验考察了声强、辐照时间、离心时间等因素对超声波促进蛋白质盐析的影响,同时又与无超声辐照的情况作对照。本研究中,利用的是超声波的机械效应。超声波作用于溶液体系,促进了传质过程,加快了电解质离子与蛋白质周围的水化层的位置更换,离子很快取代水分子,从而使蛋白质的水化层被电解质离子取代,同时中和了蛋白质表面所带的部分电荷。另一方面,超声波加速蛋白质分子碰撞,失去了水化层和电荷的蛋白质大分子,很容易絮凝析出。因此,超声波作用后的盐析体系不必静置,从而提高了蛋白质的盐析分离速度,使盐析时间最多缩短了大约4.5小时,有很好的经济前景。
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