【摘 要】
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本文对口蹄疫A型、O型流行毒株灭活病毒进行多步纯化方法,包括高转速离心、切向流超滤浓缩、PEG6000纯化,以及离子交换层析和疏水层析方法。高速离心可以去掉细胞碎片、降低料液浊度,离心后FMDV O型146S浓度为3.15 ug/m L,蛋白含量为6560μg/m L,A型146S浓度为4.2μg/m L,蛋白含量为7520μg/m L;深层过滤可进一步去除大颗粒杂质,降低浊度,FMDV O型抗原
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本文对口蹄疫A型、O型流行毒株灭活病毒进行多步纯化方法,包括高转速离心、切向流超滤浓缩、PEG6000纯化,以及离子交换层析和疏水层析方法。高速离心可以去掉细胞碎片、降低料液浊度,离心后FMDV O型146S浓度为3.15 ug/m L,蛋白含量为6560μg/m L,A型146S浓度为4.2μg/m L,蛋白含量为7520μg/m L;深层过滤可进一步去除大颗粒杂质,降低浊度,FMDV O型抗原回收率在89.96%,A型抗原回收率在89.87%;TFF超滤可高倍数浓缩,减少料液体积和去除部分杂质,FMDV O型抗原回收率在87.94%,A型抗原回收率在94.80%;PEG6000纯化可进一步降低料液体积和置换缓冲液,纯化后FMDV O型抗原回收率在82.13%,O型抗原纯度为16%,A型抗原回收率在84.24%,A型抗原纯度为15%;离子交换层析后FMDV O型抗原回收率在83.64%,O型抗原纯度为58%,A型抗原回收率在94.63%,A型抗原纯度为56%;疏水层析后FMDV O型抗原回收率在95.44%,O型抗原纯度为85%,A型抗原回收率在90.20%,A型抗原纯度为81%。本试验通过多步纯化方法,FMDV O型抗原最终浓缩倍数可达208倍,抗原回收率在51.87%,146S浓度在340.38μg/m L,纯度为85%;FMDV A型抗原最终浓缩倍数可达143倍,回收率61.25%,146S浓度在367.53μg/m L,纯度为81%,完全符合预期效果,同时在动物高免疫效果情况下,可起到良好的防控作用。
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