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水分在植物的生长发育进程中起着至关重要的作用,水分平衡的维持对高等植物营陆生固着生活和抵御各种环境逆境必不可少。现已知植物细胞的透水性和水分在植物体内的传输与植物对各种非生物逆境的响应紧密相关,说明通过调节水分的传输进而调控植物的适应性是可行的。目前植物中发现的大多数信号分子都能够调节植物的水力学特性,其中硝酸盐(NO3-)和植物激素ABA无论从理论上还是实践上对优化植物水分关系都非常重要。但是这两种信号分子在调节植物水分传输中是否有互作,以及互作的分子机制尚不清楚,探究ABA信号与NO3-信号在调节植物水分跨膜传输中的互作对深入揭示逆境下植物水力学特性的精细调控具有重要的意义。1、本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为试验材料,通过蛋白互作软件预测得到蛋白磷酸酶At ABI2与蛋白激酶At CIPK8,水孔蛋白At PIP1.1与At CIPK8,以及At PIP1.3与NO3-转运体At NRT1.2这三对组合间均存在互作,这为进一步通过生物化学方法鉴定它们之间的互作奠定了基础。2、以野生型拟南芥Col-0的cDNA为模板扩增得到At ABI2、At CIPK8、At PIP1.1、At PIP1.3与At NRT1.2的基因,分别将其连接到Bi FC载体上,构建成重组表达载体At ABI2-SPYCE、At CIPK8-SPYNE、At PIP1.1-SPYCE、At PIP1.3-SPYCE和At NRT1.2-SPYNE。转化农杆菌EHA105后侵染本氏烟草,瞬时表达观察蛋白互作情况。结果表明拟南芥水孔蛋白At PIP1.1和At PIP1.3可分别与At CIPK8和At NRT1.2发生互作。同时,蛋白激酶At CIPK8与At ABI2之间也可发生互作,共聚焦显微镜观察发现互作定位于细胞膜。3、在分离泛素化酵母双杂交系统中,以拟南芥水孔蛋白At PIP1.1和At PIP1.3以及At ABI2分别与p BT3-N构建的重组载体作为诱饵,以拟南芥At CIPK8和At NRT1.2分别与p PR3-N构建的重组载体作为猎物,共转化酵母菌株后进行互作分析。结果发现三个转化组在4缺培养基上都有菌落生长。进一步验证了拟南芥At PIP1.1与At CIPK8、At PIP1.3与At NRT1.2以及At CIPK8与At ABI2之间能发生互作,从而为进一步揭示ABA信号与NO3-信号参与拟南芥水分调节的信号转导分子机制奠定基础。