【摘 要】
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该文对简化现行无细胞百日咳菌苗生成的纯化过程进行了探索.通过两种简单的工艺,由百日咳杆菌C.S菌株制得了含有百日咳毒素(PT)和纤维血凝素(FHA)两种主要保护性抗原的纯化菌
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该文对简化现行无细胞百日咳菌苗生成的纯化过程进行了探索.通过两种简单的工艺,由百日咳杆菌C.S菌株制得了含有百日咳毒素(PT)和纤维血凝素(FHA)两种主要保护性抗原的纯化菌苗.百日咳杆菌在37℃静止培养五天后,提纯方法I是将培养物离心除去菌体,上清调pH6.8后用硫酸铵两次盐析,浸提液超速离心后得到纯化的菌苗.方法II是将培养液直接用硫酸铵分二次盐析,再通过DEAE-Sephadex-A50阴离子交换柱制得菌苗.提纯组份进行了SDS-PAGE电泳分析.用ELISA测定了PT,FHA的活力,并测定了蛋白质浓度.各提纯物经脱毒,透析后进行了动物热原质试验.结果表明,各方法制得的菌苗热原质试验基本合格.PT提纯收率(I-A为30%,95%,61%,I-B29%,86%,54%,II为17%,67%,37%)高于现行方法(21.4%,14%).比活(U/mgprotein)I-A为30×10<2>,20×10<2>,37.6×10<2>;I-B为31.5×10<2>,24.1×10<2>,37.1×10<2>;II为25.6×10<2>,25×10<2>,38×10<2>)稍低于现行方法(2.6×10<2>,54×10<2>,64×10<2>)该两种方法皆为生产工艺简单,成本较低且安全有效的无细胞百日咳菌苗的可行性方法.
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