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背景:丛生蛋白,又名睾酮抑制性前列腺信使-2(TRPM-2)或硫化糖蛋白,是一种分泌型异二聚体糖蛋白,在多种恶性肿瘤细胞中,丛生蛋白的表达都有升高,当肿瘤细胞损伤或死亡时,升高得更加显著,可看成是细胞死亡的标志。
目的:研究膀胱癌EJ细胞株内是否有丛生蛋白的表达并且这种表达能否被其反义核甘酸所抑制,同时探讨ASclusterinODN(丛生蛋白反义核甘酸)的转导能否对MMC(丝裂霉素C)等抗肿瘤药物的细胞毒性作用有促进作用,从而对临床膀胱癌的化学治疗起到一定的作用。
材料与方法:将膀胱癌细胞分为6组,conl(对照组1):转入随机排序核甘酸lug组,con2(对照组2):转入随机排序核甘酸2ug组,con4(对照组4):转入随机排序核甘酸4ug组,antil(反义组1):转入丛生蛋白反义核甘酸1ug组,anti2(反义组2):转入丛生蛋白反义核甘酸2ug组,anti4(反义组4):转入丛生蛋白反义核甘酸4ug组,于蛋白水平采用westernblot及转录水平采用RT—PCR的方法分别检测各组细胞内丛生蛋白mRNA和蛋白的表达。通过westernblot检测在膀胱癌细胞给予MMC0,2,4,8,12,18小时,丛生蛋白表达量的改变。通过流式细胞方法分别检测a组:膀胱癌EJ细胞组,b组:膀胱癌EJ细胞+ASclusterinODN(4ug),c组:EJ细胞+mmc(3ug/m1),d组:EJ细胞+mlTlC+ASclusterinODN,各组中肿瘤细胞的凋亡情况。
结果:实验证实膀胱癌EJ细胞株内有丛生蛋白的表达,同时转录入丛生蛋白反义核甘酸能减少丛生蛋白的表达:anti2组的丛生蛋白量少于con2组(p<0.05),anti4组的丛生蛋白量明显少于con4组(p
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