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目的:本研究将Notch的配体DLL4基因转染慢性髓细胞白血病细胞系K562细胞,旨在探讨外源性DLL4基因是否活化K562细胞内Notch1信号通路,及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:试验分组:①正常对照组(未转染组);②阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1组);③实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4组)。采用脂质体Lipofectinamine2000介导将各组质粒分别转染K562细胞:①分别用RT-PCR和Western blot检测转染质粒48小时后各组细胞DLL4的mRNA及蛋白表达,同时用细胞免疫荧光化学法进一步证明DLL4蛋白是否在转染细胞的细胞膜和细胞浆内高表达;②分别用RT-PCR和Western blot检测转染质粒48小时后各组细胞Notch1受体胞内区(NICD)、下游靶基因Hes1的mRNA及蛋白表达;③用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,用流式细胞仪检测转染质粒48小时后各组细胞的凋亡情况。结果:用脂质体2000介导各组质粒转染K562细胞:①RT-PCR和Western blot结果示转染质粒48小时后实验组DLL4的mRNA及蛋白表达量比两个对照组明显增多(P<0.05,有统计学意义),细胞免疫荧光化学法进一步证明DLL4蛋白主要在转染细胞的细胞膜和细胞浆内高表达,证明质粒成功转染K562细胞;②RT-PCR和Western blot结果示转染质粒48小时后实验组Notch1受体胞内区(NICD)、下游靶基因Hes1的mRNA及蛋白表达量比两个对照组明显增多(P<0.05,有统计学意义),证明外源性DLL4基因可有效活化K562细胞内Notch1信号通路;③CCK8结果示实验组细胞的生长速度明显受到抑制,实验组细胞凋亡率明显高于两个对照组(P<0.05,有统计学意义)。结论:外源性DLL4基因成功转染慢性髓细胞白血病细胞系K562细胞后,可通过活化K562细胞内Notch1信号通路,抑制细胞生长及诱导细胞凋亡。