【摘 要】
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目的:宫颈癌是一种常见的妇科肿瘤,对于进展期或复发宫颈癌患者需进行以铂类为主的标准化疗,然而,在化疗过程中部分患者通过内源性或获得性机制产生顺铂耐受,严重制约了顺铂对宫颈癌的化疗效果,影响宫颈癌患者预后。所以,通过对宫颈癌耐药潜在的机制研究、提高化疗效果至关重要。既往研究发现长链非编码RNA H19在多数肿瘤耐药组织或细胞中高表达,但与宫颈癌耐药的关系尚无定论,因此,本研究旨在探寻长链非编码RNA
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目的:宫颈癌是一种常见的妇科肿瘤,对于进展期或复发宫颈癌患者需进行以铂类为主的标准化疗,然而,在化疗过程中部分患者通过内源性或获得性机制产生顺铂耐受,严重制约了顺铂对宫颈癌的化疗效果,影响宫颈癌患者预后。所以,通过对宫颈癌耐药潜在的机制研究、提高化疗效果至关重要。既往研究发现长链非编码RNA H19在多数肿瘤耐药组织或细胞中高表达,但与宫颈癌耐药的关系尚无定论,因此,本研究旨在探寻长链非编码RNA H19在宫颈癌耐药过程中的作用,初步探讨长链非编码RNA H19在调控宫颈癌耐药中的可能涉及的机制。方法:1.培养hela顺铂耐药细胞株Hela/DDP和hela细胞株,q PCR技术分别检测两组细胞中LncRNA H19（NR＿002196.2）的表达水平。2.构建LncRNA H19干扰载体,包装成慢病毒后感染hela顺铂耐药细胞株Hela/DDP,q PCR验证感染效率,并进行稳筛干扰LncRNA H19的hela顺铂耐药细胞。3.Western Blot检测空白对照组（Hela/DDP-contral）、空载组（Hela/DDP-NC）、干扰组（Hela/DDP-siRNA）各组细胞中Nrf2的表达水平。4.根据分组分别用顺铂（DDP）处理细胞,24h后CCK-8法检测各组细胞增殖情况;结果:1.qPCR结果显示,Hela/DDP细胞组LncRNA H19表达水平明显高于Hela细胞组,（P＜0.05）2.通过siRNA干扰实验,Hela/DDP细胞内LncRNA H19表达降低,通过Western Blot实验检测出Nrf2表达水平降低,表明LncRNA H19可能调控Nrf2的表达。3.通过CCK-8增殖实验发现,沉默了LncRNA H19的Hela/DDP细胞在加入顺铂的培养基中的增殖率降低,对顺铂的敏感性升高。结论:LncRNA H19与宫颈癌顺铂耐药细胞耐药性相关,敲降长链非编码RNA H19的表达能够提高Hela/DDP细胞对顺铂的敏感性,长链非编码RNA H19可能通过调控Nrf2的表达进而导致宫颈癌耐药。
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