脉孢霉病害菌对柞水黑木耳的生长影响及防治

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脉孢霉(Neurospora spp.)污染是黑木耳(Auricularia auricula)在种植过程中最主要、危害程度很严重的真菌病害,该菌有适应能力强、繁殖速度快、孢子传播快等特点,能通过多种渠道对黑木耳种植造成侵染并迅速传播,严重影响食用菌生产。论文通过调查柞水县黑木耳致病脉孢霉的种类、分析脉孢霉的生物学特性、进一步探索脉孢霉与黑木耳生产的相互关系和作用机理,采用化学、生物防治技术对黑木耳生产中脉孢霉病害进行控制。研究结果如下:(1)从陕西省柞水县采集的被脉孢霉污染的黑木耳菌棒中分离得到3株脉孢霉,根据形态学鉴定和ITS序列分析,分离得到3株脉孢霉分别为粗糙脉孢霉(N.crassa)LY-CC、好食脉孢霉(N.sitophila)LY-HS、四孢脉孢霉(N.tetrasperma)LY-SB。(2)研究表明LY-CC、LY-HS、LY-SB 3株菌的最适碳源分别为葡萄糖、葡萄糖和乳糖,最适氮源分别为牛肉膏、蛋白胨和酵母粉,最适温度为30~35℃,最适p H值都在6~7,最适含水量为60%~65%,在此条件下,脉孢霉接种于PDA平板上,菌丝1 d内即可布满平板表面,3 d即可产生大量橘红色孢子。(3)脉孢霉是黑木耳在种植过程中的一种竞争性病害,其竞争力强,与黑木耳争夺生存空间和营养物质;污染的脉孢霉能抑制黑木耳菌丝的生长,使黑木耳菌丝枯萎,死亡。试验表明,3株脉孢霉对黑木耳的致病能力存在差异,LY-CC与LY-HS对黑木耳的抑制强于LY-SB,同株不同木耳菌株对病害菌表现不同抗性,黑29的抗性强于黑威15。(4)脉孢霉产生种类丰富的挥发性、非挥发性代谢物,能抑制黑木耳菌丝生长。对峙培养42 h时,LY-CC、LY-HS、LY-SB 3株脉孢霉挥发性物质对黑29的抑制率分别为25.19%、24.55%、15.74%,对黑威15的抑制率分别为24.86%、15.97%、14.17%;用GC-IMS法分析3株脉孢霉挥发性有机物,醇类、酯类等挥发性有机物含量较高。LY-CC、LY-HS、LY-SB 3株脉孢霉非挥发性物质对黑29的抑制率分别为22.76%、22.31%、20.44%,对黑威15的抑制率分别为21.79%、20.82%、15.88%;用LC-MS/MS法分析3株脉孢霉的非挥发性代谢物,含有大量的氨基酸及其代谢物、苯及其衍生物、有机酸及其衍生物等。(5)试验将脉孢霉接入到没有木耳菌丝的袋料菌棒(空白)、长满木耳菌丝的菌袋和木耳子实体表面,发现脉孢霉只能在存在大量氧气的菌袋培养上快速生长,在长满菌丝的培养料中不生长或生长缓慢,在木耳子实体表面能够生长;试验还发现,脉孢霉在经热处理杀菌的木耳子实体上生长速率快于未处理的木耳子实体。(6)抑菌剂高效绿霉净、代森锰锌、百菌清与多菌灵对3株脉孢霉菌丝生长均有一定的抑制作用,高效绿霉净与多菌灵的抑制作用较显著。选用4种生防菌进行脉孢霉生长抑制试验,发现解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)对3株脉孢霉有很好的抑制作用,但对木耳菌丝生长影响不大。培养24 h的B.amyloliquefaciens培养液对3株脉孢霉的抑制作用最强,对3株脉孢霉的抑制强度分别为:LY-SB>LY-HS>LY-CC。
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