【摘 要】
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对于丙型肝炎病毒(HCV)和艾滋病病毒(HIV-1)的研究,亟待解决的问题之一是建立一种经济易得、对HCV/HIV-1易感并且发病症状及人类相似的动物模型,以便对HCV/HIV-1的发病机理及
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对于丙型肝炎病毒(HCV)和艾滋病病毒(HIV-1)的研究,亟待解决的问题之一是建立一种经济易得、对HCV/HIV-1易感并且发病症状及人类相似的动物模型,以便对HCV/HIV-1的发病机理及药物筛选和疫苗进行深入研究.树鼩(Tupaia,Tree shrew)是一种大量分布于云南、广西一带,易饲养,繁殖快,分类学上接近于灵长目的小动物,已广泛用于生物医学方面的研究.有证据表明树鼩可以感染HCV.树鼩细胞可以支持HIV-1进入靶细胞后复制循环的其它步骤,但是我们实验室发现树鼩细胞并不能感染HIV-1,推测树鼩的受体CD4或辅助受体CCR5和CXCR4与人的相应的受体可能存在较大差异.目前我们实验室已经得到了树鼩的CXCR4,序列分析发现,树鼩CXCR4与人的CXCR4差别不大,可能不是限制HIV-1进入树鼩免疫细胞的原因.为此,我们根据实验室以前得到的树鼩CCR5基因的中间一段,采用5RACE技术克隆得到了CCR5 5端.此段含有决定树鼩CCR5能否支持HIV-1进入宿主细胞的关键区域,由cDNA推断出的氨基酸片段,发现在决定树鼩CCR5能否支持HIV-1进入宿主细胞的关键位点:Tyr-3,-10,-14,-15上与人CCR5差别较大,这可能是树鼩不易感HIV-1的原因之一.作为一种新型的实验动物模型,树鼩的许多生理生化、遗传背景等研究还不够充分.树鼩的免疫球蛋白的分离纯化和抗体制备对建立动物模型是必需的.在该实验中,我们采用FPLC系统结合自装柱的方法,分离纯化得到了高纯度的树鼩免疫球蛋白G,并尝试了制备抗树鼩免疫球蛋白G的抗体,但是由于对树鼩免疫球蛋白G特性不了解,免疫动物的结果不是很成功,得到的抗体的滴度较低.
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