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椭圆叶花锚(Halenia elliptica D.Don)是龙胆科(Gentianaceae)花锚属一年生或者两年生草本植物。龙胆科包括獐牙菜属和花锚属,其中已进行有关植物化学研究的花锚属只有4种:Halenia corniculata,H.elliptica,H.campanulata和H.asclepiadea。我国有该属植物两种,为花锚H.corniculata和椭圆叶花锚H.ellipitica D.Don。椭圆叶花锚是我国臧族、羌族民间常用草药之一,用于治疗急性黄疸型肝炎,胆囊炎、头晕头痛等症。以花锚为主药材研制、开发的治疗肝胆系统疾病的成品藏药,具有疗效稳定,效率高等特点。
本文针对藏药龙胆科花锚属(Halenia Borkh)椭圆叶花锚,建立椭圆叶花锚的HPLC指纹图谱,可用于此种药材优劣评价及中成药的质量控制,生产工艺等,为花锚和中成药提供科学的鉴定方法。优化的色谱条件是:色谱柱为AgilentC18(4.6×250mm,5μm);流动相为A:水一乙酸(100:0.05,v/v),B甲醇-乙酸(100:0.05,v/v),C乙腈-乙酸(100:0.05,v/v),梯度洗脱;流速1.0ml/min;检测波长为程序设置;柱温为25℃。利用HPLC-DAD建立了的反相HPLC指纹图谱,以芦荟大黄素为内标物,确立了32个特征共有指纹峰。对32个共有色谱指纹峰进行ESI-MS定性,结合相关文献确定了部分可能的组分。本工作系统地对85个不同地区的11个居群的花锚样品进行了测定,获得了各居群花锚相对含量,通过相似度计算和地理分布的对比分析,对居群内与居群间的差异进行了统计分析,结果表明,不同地区的花锚间的化学组成具有显著性差异,最后,对各居群的样品进行了聚类分析,结果表明,椭圆叶花锚的组成与其相应的地理分布和海拔等具有一定的相关性。对指纹图谱的建立进行了方法学考察,稳定性、重现性良好,保留时间的相对标准偏差为0.048%。说明该方法准确可靠,可用于椭圆叶花锚指纹图谱的研究。