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目的:观察铜绿假单胞菌PAO1野生型及QS系统基因缺陷型PA菌株人工生物膜致病性的差异,了解QS系统在PA生物膜感染致病过程中的地位。方法:1、体外实验:测定头孢他啶( ceftazidime , CAZ )、环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)及美罗培南(meropenem,MEM)对铜绿假单胞菌PAO1野生型,PAO1 lasI rhlI基因缺陷型,PAO1 lasR rhlR基因缺陷型藻酸盐微菌珠悬液及其浮游菌的MIC、MBC;用扫描电镜观察PAO1、PAO1 lasI rhlI、PAO1 lasR rhlR培养3天后形成的生物膜形态。2、体内实验:从大鼠支气管内直接予以PA(菌种为铜绿假单胞菌PAO1野生型,PAO1 lasI rhlI基因缺陷型,PAO1 lasR rhlR基因缺陷型)海藻酸盐微菌粒悬液(1×109CFU/mL)攻击,建立PAO1野生型及QS系统缺陷型菌株生物膜肺部感染动物模型。分别于1周和2周后评估各组大鼠的肺部病理学、细菌学及细胞因子(IL-4、IL-10、IFN-γ)反应的变化。结果:1、体外实验:海藻酸盐包裹PA后对MEM、CIP、CAZ的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)高于浮游菌;培养3天后,PAO1野生型可形成较厚、有孔状通道的生物膜,而PAO1 lasI rhlI基因缺陷型和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型形成的生物膜明显稀薄,未能形成成熟的生物膜结构。2、体内实验:感染1周后,PAO1野生型组的肺部大体病理改变明显重于PAO1 lasR rhlR基因缺陷组(P<0.001),肺部细菌残留量也显著大于PAO1 lasR rhlR基因缺陷组(P<0.005);2周后,PAO1野生型组的病理学改变和细菌学指标均显著重于其他两基因缺陷组(P<0.001);PAO1 lasI rhlI