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对Egonol龙胆三糖苷及以Egonol衍生物对雌二醇生成活性及其相关机制进行了研究。发现Egonol龙胆三糖苷促雌二醇最高生成率在MCF-7、HepG2、ROS1728中分别为157%、182.4%、226.8%(以空白组200μg/ml睾酮转换成E2值作为100%生成率)。活性的强弱可能与芳香化酶的组织特异性表达情况一致,说明Egonol.龙胆三糖苷促雌二醇活性可能与芳香化酶有关。芳香化酶的组织特异性表达与特异性启动子有关系,Egonol.龙胆三糖苷在各组织中皆有促雌二醇活性,说明该化合物不是通过调节该酶的基因表达而起作用。
在探究Egonol龙胆三糖苷及其衍生物是否介导cAMP-PKA途径从而影响芳香化酶的表达中,发现该系列化合物在HEK-293T细胞中对cAMP的影响非常弱小。在人HepG2细胞中显示了极强的提高cAMP的作用。而化合物对cAMP的作用与其促雌二醇活性强弱不呈正相关关系,对cAMP-PKA途径的激活可能与胞内雌激素有关。
Egonol龙胆三糖苷及其衍生物对HepG2细胞增殖影响显示,该系列化合物同雌二醇一样有相似的较弱促HepG2细胞增殖作用。而且存在一定剂量依赖性。在瞬时转染有ERE(雌激素作用元件)的HepG2中,Egonol龙胆三糖苷及其衍生物也显示了类似于雌二醇与ERE结合的作用,进一步提示Egonol龙胆三糖苷及其衍生物在HepG2细胞中具备雌激素样作用。
为研究Egonol龙胆三糖苷及其衍生物是否可能直接提高芳香化酶的活性,我们计划将芳香化酶从芳香化酶阳性细胞中克隆后表达到芳香化酶阴性的细胞中。在MCF-7细胞中以OligodT为引物合成的cDNA模板,和在ROS1728细胞中以OligodT及大鼠引物F链为引物合成的cDNA模板能成功扩增出与芳香化酶全长编码序列大小一致的片段。
Egonol衍生物在HepG2、ROS1728细胞中促雌二醇活性的实验表明,Egonol苯环上引入其它基团可以提高Egonol的活性。
从雌激素经典的基因组效应和非基因组效应两方面对雌激素信号转导研究进展进行了简单的综述。