目的:　　利用杂交瘤技术制备出可以特异性识别中药雷公藤主要活性成分雷公藤甲素(triptolide)的单克隆抗体，并对其性质进行鉴定，为后期建立雷公藤甲素含量测定的酶联免疫分析方法奠定基础。　　方法:　　1、采用琥珀酸酐法对雷公藤甲素进行结构改造，制备得到可以与载体蛋白偶联的半抗原，并采用ESI-MS法进行结构鉴定;　　2、采用EDC法制备雷公藤甲素的人工抗原，并用红外光谱法、荧光光谱法和SDS-PAGE对得到的人工抗原进行鉴定，MALDI-TOF-MS法测定合成抗原的分子量并计算偶联率;　　3、采用杂交瘤细胞融合技术制备抗雷公藤甲素的单克隆抗体。具体步骤包括免疫动物，测定血清中抗体的效价;选取血清效价最高的动物，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，筛选出有特异性的杂交瘤细胞株;　　4、扩大培养可以产生特异性抗体的单克隆细胞株和诱导产生腹水并纯化得到单克隆抗体(MAb);鉴定分型;采用SDS-PAGE鉴定其纯度;　　5、ic ELISA检测方法的建立，从包被条件、封闭液、封闭时间、抗原抗体反应时间、有机溶剂等方面，考察不同条件对IC50值的影响，进行条件优化。　　6、考察单克隆抗体的特性鉴定，包括单抗效价、敏感性，亲和性和特异性的测定。　　结果:　　对雷公藤甲素进行结构改造，成功合成出雷公藤甲素的结构类似物雷公藤甲素丁二酸单酯(TPC)，测得其分子量为460;将TPC与合适的载体蛋白成功偶联，得到了人工抗原TPC-BSA、TPC-HSA和TPC-OVA，并计算得其偶联率在8-9之间;间接ELISA法测定免疫小鼠血清的效价，最高效价达409600，免疫效果良好;采用间接ELISA法进行筛选，成功得到能够稳定分泌特异性识别雷公藤甲素的MAb的10个细胞株;成功分离纯化得到MAb2D2-H3-2G3，纯度良好，主要为IG2a和IG2b类型，轻链为kappa链。　　间接竞争ELISA法考察结果表明，当包被抗原为TPC-HSA，最佳包被浓度为2μg/mL，4℃过夜包被，最佳单抗工作浓度为1∶4000，封闭液为5％脱脂奶粉，封闭时间1.5小时，小分子化合物与单抗预混45 min，抗原抗体工作时间0.5小时，2.5％甲醇-PBS溶液作为样品溶解试剂，所建立的间接竞争ELISA法灵敏性最好。单抗2D2-H3-2G3的效价达128000，2.97×108 L/mol，雷公藤甲素的最低检测限为97.7 ng/mL，可检测的线性范围为200-0.39μg/mL，线性方程为y=-19.53x+151.1, R2为0.992。　　结论:　　本课题针对雷公藤甲素的结构特点成功设计合成出了合适的半抗原，并成功制备出人工抗原，满足动物免疫的要求;所获得的单克隆抗体2D2-H3-2G3能够特异性识别雷公藤甲素，为后期建立检测雷公藤药材中雷公藤甲素含量的免疫学方法奠定了坚实的基础。