肺鳞癌血清特异性标志物的研究

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目的: 应用双向凝胶电泳-质谱技术,研究原发性肺鳞状细胞癌患者与健康人血清蛋白质组表达图谱的差异,寻找和确定原发性肺鳞状细胞癌特征性血清标志物。为肺鳞癌的临床早期诊断、治疗以及预后评价提供可靠的、准确灵敏的实验室参考指标。 方法: 肺鳞状细胞癌患者与正常人血清标本获得后,双向凝胶电泳的第一向采用固相pH梯度电泳,第二向采用SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳分离血清蛋白质组成分。电泳后经银染或考马斯亮蓝染色,PDQuest双向凝胶电泳软件分析,将有意义的差异蛋白质点取出,经过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)鉴定。 结果: 1.通过实验获得了较好的肺鳞状细胞癌患者及正常人血清蛋白质组双向电泳图谱。 2.肺鳞状细胞癌患者血清与正常健康个体血清相比较,经双向凝胶电泳软件分析,共找到12个差异表达的蛋白质,其中4个蛋白质在肺鳞状细胞癌患者血清中含量降低,6个蛋白质含量增加,2个蛋白质点为肺鳞状细胞癌患者血清所特有。 3.在肺鳞状细胞癌中含量减低的1个蛋白质点(Spot1)和在肺鳞状细胞癌中含量增加的3个蛋白质点(Spot5、6、7)以及在肺鳞状细胞癌中所特有的1个蛋白质点(Spot11)共5个蛋白质点MALDI-TOF质谱鉴定,成功得到了5张肽质量指纹图谱,经数据库检索鉴定分析,确定在肺鳞状细胞癌患者血清中含量减低的蛋白质点Spot1是免疫球蛋白轻链V区;在肺鳞状细胞癌患者血清中含量增加的蛋白质点
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