【摘 要】
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目的:骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromes,MDS）是一组源于髓系造血干细胞的克隆性疾病,其骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多（Myelodysplastic Syndromes with Excess Blasts,MDS-EB）的发病率占所有 MDS亚型的1/3以上,在国际预后积分系统（IPSS）的评价中,MDS-EB一般可划分为中危或高危,平均转白率接近40%。
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目的:骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromes,MDS）是一组源于髓系造血干细胞的克隆性疾病,其骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多（Myelodysplastic Syndromes with Excess Blasts,MDS-EB）的发病率占所有 MDS亚型的1/3以上,在国际预后积分系统（IPSS）的评价中,MDS-EB一般可划分为中危或高危,平均转白率接近40%。在MDS-EB发病及转白过程中,可存在多种基因位点的突变和相关细胞因子的表达沉默,但其机制尚不明确。干扰素调节因子8（interferon regulatory factor 8,IRF-8）是一种重要的肿瘤抑制因子,可以通过调节相关细胞通路及细胞因子的表达来调控细胞克隆与凋亡,其表达沉默是AML,CML等血液肿瘤病发过程中的重要分子事件。MDS-EB作为血液肿瘤疾病的一种,目前关于IRF-8在MDS-EB中的表达情况尚未见报道。本课题旨在研究IRF-8在MDS-EB中是否存在异常表达,分析其表达水平与MDS-EB发病及转白过程中可能存在联系,为阐明MDS-EB的发病机制以及进一步的临床研究奠定实验基础。方法:收集3组共30例实验标本。其中20例为MDS-EB病例标本,分为MDS-EB1组和MDS-EB2组。MDS-EB1组样本来自临床确诊的MDS-EB1患者,且骨髓报告提示原始细胞数大于5%但小于10%或无Aurs小体。MDS-EB2组样本来自临床确诊的MDS-EB2患者,且骨髓报告提示原始细胞数大于10%但小于20%或有Aurs小体。20例病例标本均无染色体重现性异常。另收集10名健康样本作为实验对照组,标本来自健康体检人群。30例标本均采集自受试者外周静脉血,采集后根据病例信息进行分组,编号。另根据IPSS-R国际预后积分系统对标本再分为中危组,高危组和极高危组三组以便进行对比。标本采集后立即通过密度梯度离心法提取外周血单个核细胞,并-80℃保存待用。外周血总RNA提取采用试剂盒法,在总RNA提取后进行浓度测试,测试合格的标本再进行逆转录PCR,然后使用实时荧光定量PCR（Realtime-PCR）检测各标本的IRF-8mRNA表达水平。各组平均表达量以RQ值（x±s）表示。实验结果采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果:1:三组样本的实验结果的表达量以RQ值（x±s）表示,MDS-EB1组为（0.59±0.08）,MDS-EB2 组为（0.26±0.1）,健康对照组为（1.20±0.26）,三组样本的组间表达水平存在显著差异（P＜0.05）。2:两组病例实验组的IRF-8平均表达水平均显著低于健康对照组（P＜0.05）。3:MDS-EB组间表达水平对比,MDS-EB1的IRF-8平均表达水平显著高于MDS-EB2的平均水平（P＜0.05）,表达水平与患者骨髓原始细胞数呈负相关（-0.456,P＜0.05）。4:以IPSS-R国际预后积分系统组三组标本结果分别为中危组（0.46±0.14）,高危组（0.38±0.22）,极高危组（0.47±0.18）,三组样本的组间表达水平不存在显著差异（P＞0.05）。结论:MDS-EB病例组中IRF-8的表达相较于健康对照组的表达水平显著降低,表明IRF-8在MDS-EB中可能受到表达抑制。病例实验组的组间表达水平也存在显著差异:MDS-EB2相较与MDS-EB1,IRF-8表达水平显著降低,并与病例原始信息中的原始细胞数量呈负相关。而IRF-8表达水平与IPSS-R积分不显著相关,提示IRF-8与MDS-EB的贫血水平和细胞遗传学改变不显著相关。这表明IRF-8的表达水平可能与MDS-EB的细胞分化及发育相关,这对于MDS的诊治和分型具有重要意义。
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