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生物表面活性剂(Biosurfactants,BS)种类繁多,结构复杂,应用广泛。BS的产率低和生产成本高限制其大规模生产。目前主要通过菌种选育、优化发酵条件和培养基成份提高BS产率,并降低成本。本研究采用前期研究获得的BS产生菌Bacillus licheniformis DGG-1-3-F,通过测定发酵液菌体密度(OD600)、表面张力(ST)、乳化活性(EI24)及BS产量,研究金属离子(MgSO4、MnSO4和Fe SO4)浓度及氨基酸(Glu或Gln)添加量对菌体生长及发酵产BS的影响,以期通过改变培养基成份提高BS产量。采用不同浓度的MgSO4或MnSO4(0、0.2、0.3、0.6、0.8mM)发酵产BS的结果表明,添加MgSO4或MnSO4均能促进菌体生长和合成BS。添加0.3mM MgSO4组发酵前期的菌体生长慢且较小,BS生产较慢但产量最大(29.6 mg/L),较对照组(3.5 mg/L)提高了8倍,ST降幅(65.5%)明显高于其他组(P<0.05)。添加0.6mM MnSO4组的BS产量提高了7.5倍(27.8 mg/L),ST降幅(62.5%)高于其他组(P<0.05),但菌体生长也较慢,说明限制细胞生长速度有利于合成BS。分别添加MgSO4和MnSO4发酵的BS产量测定与薄层层析分析结果一致,BS组分均可能是糖蛋白,且发酵过程中组分无变化。利用等比例不同浓度混合MgSO4和MnSO4(0、0.1、0.2、0.3、0.4mM)发酵产BS,发现0.3mM MgSO4和MnSO4组BS产量(40.6 mg/L)提高了11.6倍,ST降幅(达68.2%)明显高于其他组(P<0.05),菌体生长慢,说明限制细胞生长可促进BS合成。以0.5mM Fe SO4分别与0.3mM MgSO4和0.3mMMnSO4混合添加均可促进发酵产BS,BS产量测定与薄层层析分析结果一致,与单独添加MgSO4或MnSO4的BS组分相同,添加不同的金属离子不改变BS组分。其中,Fe SO4与MgSO4混合添加发酵的菌体生长量及ST降幅(67.2%)均明显高于其他组(P<0.05),BS产量提高了20.4倍(79.6 mg/L)。在相同氮素浓度(0.047 M)下,分别用谷氨酸(Glu)或谷氨酰胺(Gln)全量和半量替代Na NO3(4 g/L)发酵产BS,发现半量Glu(3.46 g/L)或Gln(3.49)替代发酵的ST降幅(71.3%和70.2%)以及BS产量提高倍数(21.8和19.5),均显著高于全量Glu(6.92 g/L)和Gln(6.98 g/L)替代(P<0.05)。BS产量测定与薄层层析分析结果一致,全量Glu或Gln发酵的BS组分可能是单一糖脂或脂肽,半量Glu和Gln发酵的BS组分可能是复合糖脂或脂肽,表明Glu和Gln可促进脂肽合成。发酵上清液的泡沫稳定系数为0.94~0.98,用流速1.8 L/min的气体对100 m L发酵上清液(p H1-8)进行鼓泡分离,泡沫液提取率为55%;不同p H下,各阶段分离所得泡沫中的物质组成和含量不同。在p H1-5的泡沫提取液含较多糖、蛋白质和脂类,且各组分含量随鼓泡时间的延长而降低;在p H2鼓泡12 min的泡沫液糖(65 mg/L)和蛋白质(44.3 mg/L)浓度较大,脂(5.4 mg/L)浓度较小,鼓泡12-21 min的泡沫液糖、蛋白质及脂浓度均下降至很低。