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目的:肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma),简称HCC。是我国常见的肿瘤之一,恶性程度极高,易于复发、转移。肝癌一旦发生,其治疗困难、预后差,5年总体生存率较低。因此,积极预防HCC,研究具有阻断或抑制其发生、发展的药物,不仅具有重要的学术价值,而且也是临床的迫切需要。HCC的发生、发展过程中,如果在其形成前期,即肝癌前病变阶段给予有效的干预,延缓或阻断肝癌前病变的形成,就有可能阻断HCC的发生。HCC的癌前病变在病理学上主要表现为肝细胞非典型增生,而细胞的增殖失控和分化障碍是肿瘤发病的基本特征,研发药物抑制肝癌癌前病变细胞恶性增殖和诱导其分化,那么就对HCC的防治具有重要的价值。本实验通过采用HE染色、免疫组织化学、Masson染色等方法观察了益脾养肝方对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌前病变病理形态的影响,以及益脾养肝方对大鼠肝癌前病变细胞内PCNA和γ—GGT蛋白的影响,以明确益脾养肝方对HCC癌前病变的预防作用及其作用机制。 方法: 1.将75只雄性wistar大鼠随机分为5组:A空白对照组;B模型组组;C组益脾养肝方小剂量组;D组益脾养肝方中剂量组;E组益脾养肝方大剂量组。B、 C、D、E均组采用1%DEN生理盐水,50mg/kg腹腔注射,A组正常喂养。 2.HE(Hematoxin Eosin)染色观察各实验组大鼠肝组织形态学改变;Masson染色观察肝组织纤维化情况;免疫组化观察PCNA和GGT蛋白分布及定量比较。 3.统计学处理 运用Excel表进行实验数据录入,SPSS19.0统计软件进行数据分析。计量资料釆用方差分析,数据用X士S表示;等级资料用卡方检验。意义:P<0.05为有显著性差异。 结果: 1. HE染色:模型组大鼠肝小叶结构消失,汇管区小胆管增生,沿小胆管外侧可见异型肝细胞大量增生,有的以汇管区为中心向肝实质内爬伸样生长,破坏邻近肝板;A、E组肝小叶结构存在,可见少量变异肝细胞,B组病理改变相比A、C组较重。 2.Massion染色:可见模型组大鼠肝小叶内纤维蛋白大量表达,包绕肝小叶,中央静脉、汇管区尤其明显,而中药干预组纤维化较模型组低。 3.免疫组化:可见肝细胞胞浆内 PCNA和γ—GGT蛋白的表达,小中大剂量益脾养肝方组阳性灶表达依次减弱。 结论: 1.大鼠肝癌癌前病变阶段具有典型的病理改变特点,肝细胞大量异型增生为特征性改变,益脾养肝方方药可减轻上述病变。 2.根据Masson染色结果推测在肝癌癌前病变期出现肝纤维化甚至肝硬化,而益脾养肝方药具有改善肝纤维化作用。 3.根据免疫组化结果显示,益脾养肝方能够抑制肝癌细胞的增殖和抗氧化损伤作用,延缓肝硬化向肝癌的转变。