中药有效成分含量测定方法的研究

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中药是我国传统防治疾病的重要武器,千百年来,在我国人民的健康生活中发挥着重大的作用。随着现代科学技术的发展,传统中药也面临着现代化的问题。近年来,全世界对中药的认识也逐渐加深,开始重视,这表明中药国际市场的快速发展时期已经来临。 当前,中药要进入世界市场,实现中药现代化,首当其冲是其质量的控制,而含量测定是质量控制最关键的部分。由于中成药中化学成分十分复杂,因此在检测前需要提取、分离、精制,又由于所含有效成分量甚微,故目前多采用色谱、光谱法进行检测,其中双波长扫描法及高效液相色谱法运用较多,而且结果理想。本文以薄层扫描为主,着理讨论了其在有效成分含量测定方面的应用。 薄层扫描的定量方法,主要有外标法、叠加法、内标法。内标法应用于GC和HPLC中,通常会得到良好的工作曲线。在薄层色谱中,运用内标法就会产生较大的误差。原因是待测组分的浓度与测得信号之间做的曲线,不是一条通过原点的直线,所以分析物对内标物的相对响应因子RRF(Relative Response Factor)值,会随着内标物加入量的改变而改变。 有文献提出了一种修正方法,即新型内标法。该方法以非线性的Michaelis-Menten方程为基础,对传统的内标法进行了校正,得出新的计算公式。通过具体的样品分析测定,证明了新型的内标的确优于传统内标法。因此,新型内标法有望被推广运用。 葛根具有多种药理作用,降低心肌耗氧量,使冠脉、脑血管流量增加,明显缓解心绞痛,抗心律失常,抗氧化,增强机体的免疫力、降血糖等。作为葛根的主要有效成分葛根素(puerarin)也具有众多药理作用,且毒性低、安全范围广、药源丰富等。因此,加强药用葛根的研究,就显得意义重大,并将有良好的前景。本论文选取葛根和5种中成药为样品,以新型内标法为定量方法,对其中有效成分葛根素进行了双波长薄层扫描测定。 本实验中所选内标物为大豆甙元(daidzein),因其基本骨架与分析物葛根素相同。它们在λ=270nm处有最大吸收,λ=370nm处几乎无吸收,所以选λ_s=270nm, 1AR二370urn。因内标法要求样品中不应含有内标物,所以须分离样品中大豆贰元。以水相与乙醚相相互革取,葛根素留在水相,而大豆贰元进人乙醚层,从而实现了二者的分离。 同一条件下两组分展开效果都要理想,这是内标法的最起码要求,也是一项较困难的工作。经过反复摸索,本实验选用甲醇一乙酸乙酯一石油醚一水(1.8:6.0:3.5:0.3)作为展开剂,展开斑点清晰圆整,分离效果好,且m值合适。 对于测定结果,分别以新型内标法和传统内标法进行计算,发现前者回收率高,相对误差小,因而数据更可靠。 此外,本文还采用高效薄层双波长扫描法测定了东莫著内酯的含量,测试样品为6种中成药,展开条件为氯仿一丙酮一甲苯一冰醋酸0:0.5:0.5:0.05*勺=345urn,AR二265urn,反射法锯齿扫描。该法精密度高,准确性好,回收率理想。 本文所做工作可为含葛根等中成药的质量监控及其他相关实验提供参考价值。
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