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目的：以不同品种和不同产地怀地黄为研究对象,制定怀地黄主要苷类成分梓醇、毛蕊花糖苷、桃叶珊瑚苷、地黄苷A以及地黄苷D的含量测定方法,对怀地黄种质资源做出初步评价和优选；继而建立怀地黄鲜品及生品的HPLC指纹图谱,从而更有效地控制怀地黄质量,保证临床用药安全有效。 方法：采用HPLC法分别对13批怀地黄药材中苷类成分梓醇、毛蕊花糖苷、桃叶珊瑚苷、地黄苷A以及地黄苷D进行测定,并建立了相应的HPLC含量测定方法；采用梯度洗脱,分别建立了 13 批怀地黄样本鲜品及生品的 HPLC 指纹图谱,以相对保留时间和相对峰面积为指标进行方法学考察,采用“CHEMPATTERN化学计量学与化学指纹图谱系统解决方案软件”对其进行聚类分析及相似度分析,并对鲜品及生品的HPLC图谱进行比较。 结果：(1)建立了怀地黄的 HPLC 含量测定方法,梓醇在 0.501~8.016 µg (R2=0.9999)范围内线性关系良好,其鲜怀地黄平均加样回收率为100.76%,RSD为 2.03%,生怀地黄平均加样回收率为 99.75%,RSD 为 2.33%；毛蕊花糖苷在0.126~1.26 µg(R2=0.9999)范围内线性关系良好,其鲜怀地黄平均加样回收率为98.61%,RSD为2.15%,生怀地黄平均加样回收率为98.93%,RSD为2.54%；桃叶珊瑚苷在0.0535~1.284 µg(R2=0.9999)范围内线性关系良好,其鲜怀地黄平均加样回收率为99.75%,RSD为2.86%,生怀地黄平均加样回收率为99.38%,RSD为 2.50%；地黄苷 A 在 0.1296~1.296 µg(R2=0.9999)范围内线性关系良好,其鲜怀地黄平均加样回收率为99.60%,RSD为1.11%,生怀地黄平均加样回收率为99.62%,RSD为1.10%；地黄苷D在0.2592~2.592 µg(R2=0.9999)范围内线性关系良好,其鲜怀地黄平均加样回收率为99.93%,RSD为1.24%,生怀地黄平均加样回收率为 100.00%,RSD 为 1.34%；结果表明,所建立的测定方法简便,重复性良好。(2)初步建立了怀地黄鲜品及生品的HPLC指纹图谱建立方法,精密度、稳定性及重复性等方法考察结果显示鲜怀地黄和生怀地黄的相对保留时间RSD 值均小于 3%,相对峰面积的 RSD 值均小于 5%,均符合分析测定要求；分别建立了鲜怀地黄及生怀地黄的共有模式,其中鲜怀地黄共获得了13个共有峰,指认了其中4个色谱峰,分别为梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷A和地黄苷D；生怀地黄获得了 14 个共有峰,指认了其中 3 个共有峰,分别为梓醇,地黄苷 A和地黄苷 D；鲜怀地黄及生怀地黄相似度分析各相关系数均在 0.9 以上,表明各样本之间均有良好的相似性；聚类分析结果则将基地种植怀地黄与农户种植怀地黄进行了有效区分,进一步反映了怀地黄各样本之间的亲疏性；从而初步建立了怀地 黄HPLC指纹图谱及其质量评价方法。 结论：所建立的怀地黄中苷类成分的HPLC含量测定方法,准确,可靠,稳定,快捷,可用于怀地黄药材的质量控制及品种筛选；所建立的怀地黄HPLC指纹图谱处理方法可用于怀地黄药材的质量控制。