Mir-132-3p靶向下调SOX4基因抑制肝癌细胞增殖、迁移侵袭的实验研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuen370181406
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目的:探讨mir-132-3p是否靶向调控SOX4基因(sex-determining region Y-box 4)抑制肝癌细胞增殖、迁移侵袭。方法:将hep G2细胞进行实验分组:正常对照组不接受任何处理;mimics对照转染组;hsa-mir-132 mimics实验转染组。采用实时荧光定量PCR检测hep G2细胞中mir-132-3p的表达量;同时采用实时荧光定量PCR和western blot检测hep G2细胞中SOX4 m RNA和蛋白质的表达水平;运用MTT检测24h、48h、72h hep G2细胞中各时期细胞增殖率情况;流式双标检测细胞凋亡情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Transwell来检测肝癌细胞的侵袭。结果:(1)实时荧光定量PCR结果显示:hsa-mir-132 mimics转染组hep G2细胞mir-132-3p的表达水平为(3.001±0.218),明显高于正常对照组(0.930±0.102)和mimics转染组(0.910±0.088),差异具有统计学意义,P<0.05。hsa-mir-132mimics转染组hep G2细胞中SOX4 m RNA的表达量(0.388±0.114),明显低于正常对照组(0.894±0.156)和mimics转染组(0.918±0.157),差异具有统计学意义,P<0.05。(2)Western blot检测hep G2细胞中SOX4蛋白质的表达情况显示:hsamir-132 mimics转染组hep G2中SOX4/GAPDH的值为(0.180±0.045),明显低于正常对照组(0.647±0.032)和mimics转染组(0.663±0.032),差异具有统计学意义,P<0.05。(3)MTT实验结果显示:以正常对照组24h、48h、72h细胞增殖率100%为参照,hsa-mir-132 mimics转染组hep G2细胞转染后24h、48h、72h细胞增殖率分别为91.77%、84.55%、76.68%,明显低于mimics转染组转染后24h、48h、72h细胞增殖率99.89%、99.94%、100.56%和正常对照组100%,差异具有统计学意义,P<0.05。(4)流式检测结果显示:(1)细胞凋亡结果显示:hsa-mir-132 mimics转染组细胞凋亡率为(18.79±0.44)%,明显高于正常对照组(6.83±0.21)%和mimics转染组(6.01±0.25)%,差异具有显著性,P<0.05。(5)划痕与Transwell的实验结果:(1)24h后hsa-mir-132 mimics转染组细胞迁移数为(41±19)个,明显低于正常对照组(232±38)个和mimics转染在(225±28)个,差异有统计学意义,P<0.05。(2)hsa-mir-132 mimics转染组中hep G2细胞穿膜数量为(29±2)个,低于正常对照组(52±2)个和mimics转染组(51±1)个,差异有统计学意义,P<0.05。结论:过表达Mir-132-3p很可能通过下调SOX4抑制肝癌细胞的细胞增殖、迁移侵袭。
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