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本研究从10种昆虫病原线虫中分离出250个共生菌菌株,通过生物测定,筛选出胃毒活性较强的菌株,并对其杀虫活性进行了深入的研究,现将主要研究结果总结如下: 1.筛选出高毒力菌株—Xenorhabdus nematophila HB310-59菌株和对昆虫病原线虫共生菌敏感的昆虫—菜青虫。 2.HB310-59菌株有很广的杀虫谱,对小菜蛾、马铃薯瓢虫均可在72h校正死亡率达100%;对菜青虫在120h校正死亡率为100%,对其致死中浓度LC50为3.2105×106个cells/ml;对棉铃虫、甜菜夜蛾、玉米螟、粘虫、黄粉虫的体重抑制率在120h分别为97.64%、91.23%、82.34%、43.75%、29.39%。 3.对HB310-59菌株胞外和胞内物质杀虫活性的研究结果,胞外和胞内均含有胃毒素,胞内蛋白粗提物和胞外蛋白粗提物对初孵棉铃虫的体重抑制率分别为98.13%、93.77%,随着试虫龄期的增加,各自的杀虫效果也在降低,对3龄棉铃虫的体重抑制率分别为76.04%和69.93%;胞内蛋白粗提物对大蜡螟的血腔活性,在12h对其致死中量(LD50)为73.9μg胞内总蛋白。 4.HB310-59菌株理化特性的研究。HB310-59菌株的菌液、胞外上清、细胞和胞内上清在4℃能稳定存放至少4个月,胞内蛋白粗提物在4℃能稳定存放至少5个月而胞外蛋白粗提物在4℃不能存放1个半月;HB310-59菌株能耐50℃处理10min,而在70℃处理10min时,其杀虫活性显著下降;在用20W紫外灯照射时,共生菌菌液能抗紫外线1h,细胞能抗紫外线0.5h而对各自的杀虫活性没有显著性影响,而胞外上清则经紫外线照射0.5h后,其杀虫活性就受到影响;在分别用蛋白酶K、1M NaCl、50%(v/v)丙酮和0.1%(w/v)SDS室温处理粗提物1h时,蛋白酶K对胞内和胞外蛋白粗提物的杀虫活性均没有影响,其它三种试剂1M NaCl、0.1%w/vSDS、50%v/v丙酮对胞内蛋白粗提物的杀虫活性影响要比对胞外蛋白粗提物的影响小的多,其中50%v/v丙酮对胞外蛋白粗提物的杀虫活性影响最大,其次为0.1%w/vSDS,相对来说0.1%w/vSDS对胞内蛋白粗提物对杀虫活性影响最大,其次是50%v/v丙酮。 5.HB310-59菌株胞外的SDS-PAGE电泳图谱的13条带在胞内也都含有,而且胞内含有的蛋白种类要比胞外的多,相应种类的蛋白含量也是胞内比胞外的高。 6.胞内蛋白粗提物对5龄初棉铃虫围食膜的影响,主要是作用于两种蛋白质,一种是分子量在76kDa左右,作用时间是从30min到28h,另一种是分子量约在87kDa左右,作用时间是从8h到48h。另外,解剖镜观察结果表明,用胞内蛋白粗提物处理棉铃虫围食膜之后3h膜开始呈一端不完整而仍有弹性的乳白色的膜,4h~28h膜均成为乳白色的碎片,到36h膜又成为一条一端不完整而又有弹性的乳白色的膜,到48h膜和对照的膜基本上是一样的,即为一条完整而又有很好弹性的透明的薄膜。