【摘 要】
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目的 研究脑梗死（Cerebral infarction,CI）后肠道菌群种类和丰度的变化对肠源性热休克蛋白72（Heat shock protein,HSP 72）表达的影响。方法 1.纳入2020年10月至2021年11月期间于杭州市第一人民医院神经内科住院的50例CI患者和体检中心50例无基础疾病的健康志愿者。采集每个纳入者的粪便样本,记录两组临床基线资料。2.使用16s rRNA基因测序方
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目的 研究脑梗死（Cerebral infarction,CI）后肠道菌群种类和丰度的变化对肠源性热休克蛋白72（Heat shock protein,HSP 72）表达的影响。方法 1.纳入2020年10月至2021年11月期间于杭州市第一人民医院神经内科住院的50例CI患者和体检中心50例无基础疾病的健康志愿者。采集每个纳入者的粪便样本,记录两组临床基线资料。2.使用16s rRNA基因测序方法进行肠道菌群多样性分析,酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定粪便 HSP 72 指标。3.统计学分析病例组和健康对照组微生物组学差别,菌群与HSP72的相关性。结果 1.基线资料分析,性别、年龄、吸烟史、低密度脂蛋白水平在两组间无统计学差异。病例组中合并高血压占72%（36/50例）,CI组中合并糖尿病占50%（25/50例）,CI中合并房颤占3%（3/50例）。病例组胆固醇、甘油三酯、同型半胱氨酸水平高于对照组,尿酸、HSP 72水平低于对照组。2.病例组与对照组样本的优势菌门相同,分别是硬壁菌门（Firmicutes）（47.67%,57.63%）、拟杆菌门（Bacteroidetes）（21.00%,19.05%）、放线菌门（Actinobacteria）（14.47%,13.10%）和变形菌门（Proteobacteria）（12.01%,7.93%）。两组的Alpha多样性无统计学差异。Beta多样性有统计学意义（p＜0.05）。3.两组间菌群丰度差异比较。CI组中,肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、Bacilli、乳酸菌目（Lactobacillales）和克雷伯氏杆菌属（Klebsiella）为特征性菌群。而在对照组中,梭状芽胞杆菌目（Clostridialleis）、硬壁菌门（Firmicutes）、粪菌属（Faecalibacterium）和疣微菌科（Ruminococcaceae）为特征性菌群。区分两组样本间差异的关键菌属包括乳酸菌属、梭状芽胞杆菌属、粪菌属、Subdoligranulum。4.将CI组中基础疾病情况与属水平丰度前20的菌群做斯皮尔曼相关性分析。结果得出,与未患高血压患者相比,合并高血压的患者粪便中链球菌属（Streptococcus）丰度增加（rho=0.33,p＜0.01）,Subdoligranulum 丰度减少（rho=-0.35,p＜0.01）。与未患糖尿病患者相比,合并糖尿病的患者粪便中克雷伯杆菌属（Klebsiella）丰度增加（rho=0.30,p＜0.01）,Subdoligranulum 丰度减少（rho=-0.40,p＜0.01）。将全部研究对象的检验指标与属水平丰度前20的菌群做斯皮尔曼相关性分析。结果得出,LDL水平与肠道菌群种类丰度无明显相关性。随TC水平升高,梭杆菌属（Fusobacterium）丰度增加（rho=0.41,p＜0.01）,粪菌属（Faecalibacterium）丰度减少（rho=-0.38,p＜0.01）。随TG水平升高,梭杆菌属丰度增加（rho=0.20,p=0.04）,粪菌属丰度减少（rho=-0.23,p=0.03）。随HCY水平升高,克雷伯杆菌属丰度增加（rho=0.20,p=0.04）,Subdoligranulum丰度减少（rho=-0.40,p＜0.01）。随UA水平升高,双歧杆菌属（Bifidobacterium）丰度增加（rho=0.22,p=0.03）。5.随粪便HSP 72水平的升高,粪菌属和罗氏菌属（Roseburia）丰度增加（rho=0.26,p=0.01;rho=0.21,p=0.04）,克雷伯杆菌属丰度减少（rho=-0.23,p=0.03）。6.CI组粪便HSP72水平中位数比对照组低,差异具有统计学意义（p＜0.01）。7.粪菌属、罗氏菌属和克雷伯杆菌属是两组样本的核心影响菌,CI组粪菌属和罗氏菌属丰度下降,克雷伯杆菌属丰度增加。结论 第一,CI组肠道菌群的丰富度和均匀度与对照组相似,硬壁菌门与拟杆菌门是多数人群肠道的优势菌门,两组间物种组成存在差异。CI组特征性菌群是肠杆菌科和Bacilli,对照组特征性菌群是梭状芽胞杆菌目和硬壁菌门。第二,随粪便HSP 72水平下降,粪菌属和罗氏菌属丰度减少,克雷伯杆菌属丰度增加。第三,CI后HSP 72水平下降,可能与粪菌属和罗氏菌属丰度减少,克雷伯杆菌属丰度增加有关。
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