目的:1.观察不同浓度H₂O₂短时间处理对KM小鼠1-细胞胚体外发育的影响。2.观察淫羊藿苷（ICA）是否能逆转H₂O₂预处理导致的KM小鼠植入前胚体外发育阻滞。3.研究ICA对H₂O₂预处理KM小鼠1-细胞胚内活性氧自由基（ROS）、线粒体膜电位水平以及小鼠合子基因组激活（ZGA）中四个相关基因表达的影响,探讨ICA对H₂O₂诱导的小鼠植入前胚氧化应激损伤保护作用的机制,为改善哺乳动物植入前胚体外培养体系奠定实验基础。方法:1.取KM小鼠1-细胞胚,置于不同终浓度H₂O₂的KSOM培养液中培养30min后,分别移入KSOM培养液中继续培养,观察各组发育情况,确定H₂O₂诱导小鼠1-细胞胚氧化应激损伤的适宜浓度。2.取KM小鼠1-细胞胚,置于含适宜浓度H₂O₂的KSOM培养液中培养30min后,分别移入添加不同浓度ICA的KSOM培养液中继续培养,观察各组发育情况,确定ICA对H₂O₂预处理的小鼠1-细胞胚氧化应激损伤的保护作用及最佳作用浓度。3.取KM小鼠1-细胞胚,根据确定的H₂O₂和ICA的适宜浓度,分成KSOM组、H₂O₂组、H₂O₂+ICA组进行培养。收集各组1-细胞胚（h CG后30h）分别进行DCFH-DA和JC-1染色,用荧光显微镜检测ROS和线粒体膜电位水平。利用Realtime-PCR检测各组中Zscan4d、Mu ERV-L、Hsp70.1、e IF-1A四种基因m RNA的表达水平。结果:1.KM小鼠1-细胞胚经不同终浓度的H₂O₂预处理30min后,2-细胞胚、4-细胞胚和囊胚的发育率均低于KSOM对照组。其中终浓度为40μM和60μM的实验组,2-细胞胚、4-细胞胚和囊胚的发育率显著降低（P<0.01）;经80μM H₂O₂预处理后,小鼠植入前胚发育完全阻滞于1-细胞胚。2.ICA能够减轻60μM的H₂O₂对KM小鼠1-细胞胚的氧化应激损伤。其中添加终浓度为40μM ICA的实验组保护作用最为明显,与60μM H₂O₂预处理组相比,2-细胞胚、4-细胞胚和囊胚的发育率显著提高（P<0.01）。3.荧光显微镜显示,H₂O₂组与KSOM组相比,1-细胞胚内的ROS水平显著提高（P<0.01）,线粒体活性显著降低（P<0.01）;ICA组与H₂O₂组相比,1-细胞胚内的ROS水平显著下降（P<0.01）,线粒体活性显著上升（P<0.01）。4.Realtime-PCR结果显示,相对于KSOM组,H₂O₂组与ICA组1-细胞胚内的Zscan4d和Mu ERV-L m RNA水平均明显下降（P<0.01）,但H₂O₂组与ICA组之间差异无统计学意义（P>0.05）;与KSOM组相比,H₂O₂组的e IF-1A m RNA水平显著下降（P<0.01）,而ICA组的e IF-1A m RNA水平较H₂O₂组明显上升（P<0.05）;各组的Hsp70.1 m RNA水平之间没有明显差别（P>0.05）。结论:1.适宜浓度（40μM）的ICA能够减轻较高浓度（60μM）的H₂O₂对KM小鼠1-细胞胚的氧化应激损伤,显著提高2-细胞胚、4-细胞胚和囊胚的发育率;2.ICA能够降低H₂O₂预处理的KM小鼠1-细胞胚内的ROS水平,从而减轻植入前胚体外培养时过量ROS造成的氧化应激损伤。同时,ICA能够提高线粒体活性,对线粒体具有一定的保护作用,确保其正常的生理功能;3.ICA使H₂O₂预处理的KM小鼠1-细胞胚内下降的ZGA相关基因e IF-1A m RNA表达水平回升,提示ICA可影响与ZGA相关基因的表达,可能与调节特定的信号通路有关。