论文部分内容阅读
山核桃(Carya cathayensis)是中国特有的经济树种和干果,因其较高的营养价值和经济价值,近年来山核桃产业得到了极大的发展,但由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的山核桃干腐病在浙西等山核桃主产区普遍发生,并且受害面积逐步扩大,严重制约了山核桃产业的可持续发展。本研究通过对山核桃干腐病菌的基础生物学及其侵染、传播的定量监测技术的研究,为山核桃干腐病菌的灾变机制分析提供研究基础,为未来更加生态化、长久性的控制山核桃干腐病的发生与危害提供依据和指导。主要研究结果如下:1.通过对不同枝龄山核桃枝条的接种,发现随着枝条枝龄的增长,干腐病病斑扩展速度不断减缓,1、2年生枝条的病斑扩展速度远快于3、4年生枝条;当环境温度为25℃,相对湿度接近75%时,干腐病菌在山核桃枝条及幼苗上侵染的成功率最高且病斑扩展速度较快,而对于临安山核桃的果实及叶片则不能造成危害。2.根据系统发育结果,结合形态学鉴定及序列比对分析,将采集到的病原菌分为分为5组:第一组为B.dothidea,共分离得到89株,占分离菌株的92.71%;第二组为B.fabicerciana,共分离到4株,占分离菌株的4.17%;第三组为B.corticis,共分离得到1株,占分离菌株的1.04%;第四组为B.qingyuanensis,共分离得到1株,占分离菌株的1.04%;第五组为Lasiodiplodia theobromae,共分离得到1株,占分离菌株的1.04%;最终判定病原菌B.dothidea为引起临安昌化镇、龙岗镇、清凉峰镇、湍口镇、太阳镇等地区山核桃干腐病的优势种群。3.建立了干腐病菌的q-LAMP检测体系,该体系理论上能检测到低至0.001ng/μL浓度水平的基因组DNA以及浓度为1×10~1个/mL的孢子DNA,为此项技术在山核桃林间的成功应用做了铺垫。4.利用建立的q-LAMP检测技术,可以检测到树干表面没有症状的样本;并随着采集样点垂直高度的增加以及与可见病斑距离的加大,检测到干腐病菌DNA量不断减少,但当采集距离超过20 cm时检测成功率会大大降低,同时利用该技术可以监测雨水和空气中孢子量的变化,为山核桃干腐病的病情预测和防治提供指导建议。