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木质纤维素是地球上最丰富的可再生生物质资源,以其为原料有效的生产的生物燃料是未来可持续发展的关键。由于纤维素分子链之间牢固的共价键结构,传统的糖苷水解酶降解纤维素的效率有限。获得高效降解纤维素的方法是目前生物燃料生产的关键。太瑞斯梭孢壳霉（Thielavia terrestris）是一株嗜热丝状真菌,可以在40-50℃条件下正常生长,具有生产多种耐热型纤维素水解酶的能力,是潜在的工业纤维素酶生产菌株。多糖单加氧酶（polysaccharide monooxygenases,PMOs）是一类新发现的铜离子依赖性氧化酶,能显著提高纤维素酶降解木质纤维素的效率,具有广泛的应用前景。真菌中作用于木质纤维素的多糖单加氧酶属于AA9（Auxiliary activity families 9,AA9）家族蛋白,在太瑞斯梭孢壳霉基因组中共有19个AA9家族蛋白的基因。本工作首先构建了太瑞斯梭孢壳霉的组成型表达系统,利用太瑞斯梭孢壳霉的3-磷酸甘油醛脱氢酶基因gpd的启动子、终止子构建了太瑞斯梭孢壳霉表达载体pUC-Pgpd-Tgpd,使用太瑞斯梭孢壳霉的木聚糖酶基因xyn作为报告基因构建表达盒pUC-Pgpd-xyn-Tgpd,将表达盒与pAN7-1质粒共转化太瑞斯梭孢壳霉,筛选得到7株转化菌株。经发酵培养,通过实时荧光定量PCR测定了转化菌株xyn基因的相对表达量最高为野生型菌株的39.0倍;通过对其木聚糖酶活的测定,测得转化子木聚糖酶酶活为39.6U/m L,相对野生型菌株提升了276%。选取THITE170174与THITE128130两个AA9基因,分别命名为TtAA9A,TtAA9B,以pUC-Pgpd-Tgpd表达载体构建太瑞斯梭孢壳霉AA9蛋白表达盒,,将表达盒与pAN7-1质粒共转化太瑞斯梭孢壳霉,筛选得到TtAA9A转化菌株9株,TtAA9B转化菌株5株。经发酵培养,通过SDS-PAGE验证,可见粗酶液中对应蛋白大小位置上有明显的条带。将粗酶液分别加入以稻草粉和微晶纤维素为底物的纤维素酶水解体系,结果显示在稻草粉底物中TtAA9A和TtAA9B对纤维素酶酶活的提升分别64.7%和22.2%。在微晶纤维素底物中TtAA9A和TtAA9B对纤维素酶酶活的提升分别50.6%和22.2%。本工作成功构建了一种太瑞斯梭孢壳霉的组成型表达系统,并通过该表达系统进行了两个AA9家族蛋白的表达,验证了表达产物对纤维素酶酶活的促进作用,为通过真菌多糖单加氧酶提高纤维素酶的水解效率提供了技术支持。