过渡金属—多吡啶—菲咯啉类核酸荧光探针的合成、表征及应用研究

来源 :福州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hexin123456789
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过渡金属离子配合物作为核酸探针是近年来发展起来的一个重要研究领域,某些手性金属配合物能作为荧光探针,对不同类型的DNA进行选择性分子识别,在探索DNA的结构、作用机理及其功能,染色体变异检测、肿瘤分子检测、病毒检测等方面都有广泛应用。因此本论文开展此课题研究具有重要的意义。 目前此类过渡金属配合物的研究都集中在以钌为中心离子的多吡啶配合物上,对其他过渡金属配合物的研究较少。本论文尝试使用其他过渡金属离子代替钌,寻找新的荧光探针。 本学位论文共分六章。 第一章阐述了过渡金属配合物与核酸结合的研究意义,介绍了核酸的基本常识,过渡金属配合物在生物分析中的主要应用以及主要的检测手段,并对现有的配合物作了详尽的介绍,同时阐述了本论文的研究目的、意义、研究内容及结果概要。 第二章研究了八面体过渡金属配合物的合成方法,改进某些中间体的合成路线,并对反应条件进行了优化,提高了产品的产率,合成了10种不同的过渡金属-多吡啶-菲咯啉混和配合物,并用元素分析,红外光谱对配合物进行了表征。 第三章主要用荧光法,紫外光谱法对所合成的配合物与核酸的结合状况进行了研究。配合物在与DNA结合后,荧光大多数增强,紫外光谱发生了减色效应和红移。最终从所合成的配合物中筛选出[Ni(phen)2 PHPIP]·2ClO4,其在DNA加入后荧光峰显著增强,有望成为新的荧光核酸探针。 第四章使用自制的配合物[Ni(phen)2PHPIP]2+研究了与fs-DNA在pH=4.0条件下相互作用的电化学行为。DNA的存在能导致[Ni(phen)2PHPIP]2+氧化还原峰电流降低,峰电位基本不变。通过测定DNA引入前后的一些电化学参数,推测[Ni(phen)2PHPIP]2+与DNA在该条件下结合生成了一种非电活性的超分子化合物。针对该类型体系,推导出了一系列的方程,求得该超分子化合物的组成为1:1。摘要A})、t:,aCt 第五章首次使用自制的配合物!Ni(PI:en):PHPIP」2+作为荧光探全十,分别测定了配合物与fs一DNA和ct一DNA的结合情况,并对反应的机理进行了深入地探讨。研究发现ct一DNA是B型DNA,能使配合物的荧光峰大幅增强,是典型的插入结合,而带有A型DNA特征的fs一DNA使配合物荧光增强的幅度却不如Ct一DNA,带有表面静电结合的特征,对于变性DNA,探针荧光不增强。因此我们所合成的配合物!N,(phen):PHPIP]2+可以成为研究配合物与DNA作用结合方式,确定DNA构型的新型荧光探针。 第六章对本论文的工作做了总结,并提出了荧光探针的发展趋势 本论文在核酸荧光探针的设计和合成方面,进行了大胆的改进和创新研究,对新型核酸探针一的光谱性质,与核酸结合的反应机理进行了f亡细的研究,取得了新型核酸荧光探针组成与性质之间的某些日-质,龙其是我们所合成的配合物[Ni(phon)ZPHPIP]2十作为荧光探个{对ONA的识别检测,在国内外属首创,为研究开发新型的过渡余属荧光核酸探针提供了新的理论和实验依据
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