一、研究背景和目的 白癜风是一种获得性黑素细胞破坏所致皮肤和毛发色素脱失，其发病机制目前尚不清楚，国内外大量研究表明，该病发病机制可能与遗传、免疫、神经等方面有关。近年来越来越多研究发现在白癜风发生和发展过程中有很多细胞因子参与。黑素细胞与周围的角质形成细胞密切相邻，调节人黑素细胞的生长因子部分是由邻近角质形成细胞产生和分泌的。研究证实围绕在黑素细胞周围的角质形成细胞能分泌内皮素-1(ET-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，ET-1可通过受体介导的信号传导途径刺激黑素细胞的增殖，黑素生成及增加酪氨酸酶的活性。bFGF是黑素细胞生长分化的重要因子，是黑素细胞的内源性促分裂剂。因此，研究这些细胞因子对于探索白癜风的发病机制及寻找白癜风治疗的新方法具有一定意义。迄今为止，国内外尚未见有中药对角质形成细胞分泌ET-1和bFGF影响研究的报道。 本实验以门诊手术室提供的儿童包皮为材料，培养人角质形成细胞。通过观察本科室临床用于治疗白癜风的中药(加味桃红四物汤，又名皮康口服液)对角质形成细胞分泌的细胞因子ET-1和bFGF的变化，探讨皮康口服液对角质形成细胞分泌ET-1和bFGF的影响，从而为皮康口服液治疗白癜风提供实验理论依据，为进一步探讨中药治疗白癜风的作用机理奠定基础。浙江大学硕士学位论炙一几、研究对象和方法 1、研究对象 角质形成细胞:由本院外科门诊手术室提供的正常儿童环切包皮经分离培养后获得，用于本次研究的为第4代细胞。 中药:加味桃红四物汤(又名皮康口服液)，由黄茂、生晒参、当归、丹参、生地、红_花、桃仁、赤芍、川芍、_女贞子、旱莲草等组成。本院制剂室用水提醇沉法制备，lomL/支，相当于」:药12.29/支。 2、力‘法 中药对角质形成细胞增殖影响的测定采用MTT法。 「}一‘药对角质形成细胞分泌ET-1和bFGF影响的测定采用ELISA法。 3、统计学处理 应用SPSSIO.0统计软件对实验数据进行处理。两个样本均数的比较采用t检验。三、结果 】、，高浓度的皮康口服液(4 .27、5.49、6.lmg/mL)细胞增殖指数明显高于对照组 (只0.05)，而低浓度的皮康口服液(l .22、1 .83、3.05mg/mL)细胞增殖指数与 对照组无明显差异(乃0.05)。 2、高浓度(5.49mg/mL)或低浓度(l .83mg/mL)皮康口服液组角质形成细胞分 泌ET-1的量均明显高于不加皮康日服液的对照组(只0.01)，而加入皮康口服 液组角质形成细胞分泌bFGF的量与不加皮康口服液的对照组无明显差异 (乃().()5)。四、结论 1、高浓度的皮康口服液对角质形成细胞增殖有促进作用，而低浓度的皮康口服 液对角质形成细胞增拍无促进作用。 2、皮康口服液能促进角质形成细胞分泌ET-1，而不能促进角质形成细胞分泌 bFGF。 3、皮康口服液在体外可刺激角质形成细胞分泌ET-1，提示其治疗白瘫风的作用浙江大学硕士学位论义机理可能是通过促进角质形成细胞分泌ET-1，进而促进黑素细胞的增殖、黑素生成及增加酪氨酸酶的活性这·途径。