论文部分内容阅读
背景和目的：胆管癌(‘cholangiocarcinoma, CCA)的预后很差,对放化疗不敏感。光动力治疗(photodynamic therapy, PDT)已在国外胆管癌治疗方面取得初步成果。本部分的研究主要探讨：二氢卟吩e6(Chlorin e6, Ce6)光动力治疗对QBC939胆管癌细胞株的杀伤作用。方法：实验分为A、B、C、D四组：A组：空白对照组；B组：单纯光照组；C组：单纯光敏剂组,即药物暗毒性组；D组：光动力治疗组,给予光敏剂与光照(二氢卟吩e6的浓度梯度为2、4、6、8、10、12、14mg/ml;光照强度梯度为5、10、15J/cm2)。CCK-8法测定PDT对各组胆管癌细胞的细胞活性的影响。DCFH-DA法检测Ce6介导的光动力治疗时细胞内产生的活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS)的含量。Cell Death Detection ELISA方法检测PDT对胆管癌细胞的杀伤作用。FITC-annexin V-PI法检测QBC939细胞的凋亡情况。结果：光动力处理组(D组)胆管癌细胞的生长受到明显的抑制,与其它各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。相同光敏剂浓度,不同光照强度对胆管癌细胞的生长抑制无明显差别。不同光敏剂浓度,相同光照强度(5J/cm2)的PDT诱导的QBC939细胞内产生的ROS含量、细胞死亡(EF值)与凋亡,随光敏剂浓度增高而增加。结论：光动力疗法对人胆管癌细胞有显著杀伤作用。光动力疗法对胆管癌细胞的杀伤作用与光敏剂的剂量有显著效应关系。背景和目的：胆管癌细胞自分泌白介素-6(interleukin-6,IL-6),可以维持信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3, STAT3)的持续性活化。Bcl-2/Bax蛋白处于STAT3信号通路的下游,对肿瘤细胞的凋亡调控起重要作用。胆管癌光动力治疗(photodynamic therapy)后对IL-6自分泌的影响仍不明确。本部分的研究主要探讨二氢卟吩e6光动力治疗对QBC939胆管癌细胞表达IL6/STAT3及其相关凋亡蛋白Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法：1)QBC939细胞光动力处理如论文中第一部分所示。2)用Human IL-6Detection ELISA方法测得QBC939细胞上清液中IL-6含量；3)用免疫印迹法检测PDT对QBC939细胞内STAT3、p-STAT3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果：光动力治疗组中,随光动力参数值的递增,PDT24h后胆管癌细胞上清液中IL-6含量依次递增,P值<0.05；PDT6h后QBC939细胞内的STAT3、p-STAT3蛋白表达降低,P值<0.05; PDT6h后QBC939细胞内的Bcl-2蛋白表达依次递减,Bax蛋白表达依次递增,P值<0.05。结论：Ce6-PDT可以胆管癌细胞上清液中IL-6含量呈现依次递增。但是Ce6-PDT抑制了QBC939细胞内p-STAT3及其抗凋亡蛋白的表达。