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目的:本文从表观遗传学角度入手,探索子宫内膜异位症(endometriosis,EM,内异症)中雌激素代谢关键酶St AR、NR5A1与DNA甲基化关系,为解析内异症发病机理提供参考。方法:首先采用q RT-PCR方法分析对照组、EM患者在位和异位子宫内膜组织中DNA甲基转移酶(deoxyribonucleic acid methyltransferases,DNMTs)、羟化酶(ten eleven Translocation,TETs)、St AR、NR5A1的基因表达情况;应用亚硫酸氢盐测序(BSP)技术分析St AR、NR5A1基因启动子DNA甲基化特征;进而采用免疫组织化学对DNMTs进行定位分析;接着通过体外原代细胞模型,以去甲基化试剂(5-Aza-2’-deoxycytidine,ADC)为阳性对照,分别采用BSP和q RT-PCR方法研究、LXA4、E2、IL-1β分别对St AR、NR5A1基因水平及DNA甲基化状态的影响;最后用q RT-PCR方法检测LXA4、E2、IL-1β对DNMTs、TETs表达的影响,探索影响基因DNA甲基化的可能机理。结果:EM患者异位病灶中St AR、NR5A1 m RNA表达水平较对照组及EM患者在位子宫内膜显著升高(P<0.001);而EM患者St AR、NR5A1基因启动子的DNA甲基化水平较对照组子宫内膜明显下降(P<0.05);St AR、NR5A1基因启动子DNA甲基化程度和m RNA表达水平之间具有负相关性,其中St AR、NR5A1的相关系数分别为-0.7820和-0.7369。体外原代细胞实验研究发现,去甲基化试剂ADC处理在位内膜间质细胞后,St AR、NR5A1基因水平表达上调;LXA4、E2可不同程度促进St AR基因表达,但对DNA甲基化水平无明显作用;外源性LXA4、E2可降低在位内膜间质细胞中NR5A1基因启动子DNA甲基化水平;IL-1β对St AR和NR5A1启动子DNA甲基化模式均无明显影响。同时我们发现,DNMT1、DNMT3B m RNA表达水平在异位病灶中显著降低(P<0.01),低于对照组及EM患者在位内膜组织;DNMT3A m RNA表达水平在异位病灶中显著低于在位内膜组织(P<0.001),而在异位病灶与对照组内膜组织中的表达差异不具显著性意义(P>0.05);异位病灶中TET2、TET3mRNA表达水平低于对照组及EM患者在位内膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05);异位病灶中TET1 m RNA表达水平低于对照组(P<0.05)而与在位内膜的差异不显著(P>0.05);不同浓度LXA4、E2处理后DNMTs、TETs基因水平表达异常,LXA4干预后DNMTs、TETs表达均升高;300 n M E2干预后,在位间质细胞中DNMT1、TET2 m RNA表达升高而DNMT3A、DNMT3B、TET3 m RNA表达降低。结论:内异症中存在DNA甲基化的异常修饰,外源性E2、LXA4可以打破DNMTs、TETs两类酶之间的平衡,降低内异症中St AR、NR5A1的甲基化水平,上调相应基因表达,促进异位病灶中雌激素的合成,参与内异症的发生发展。