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研究背景：脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)致残率高,治疗困难,一直是医学界的一大难题。脊髓损伤是脊椎外伤最严重的并发症之一,经常会导致损伤节段以下肢体的功能障碍甚至截瘫。脊髓损伤不但给患者本人带来了身心上的严重创伤,而且给社会国家造成了巨大的经济负担。脊髓损伤包括原发性损伤和继发性损伤,原发性损伤可直接造成损伤部位的细胞死亡,继发性损伤则主要包括炎症反应、兴奋性毒性、血管破坏所致的缺血坏死、再灌注损伤和自由基等。炎症反应是脊髓继发性损伤的重要进程,而小胶质细胞的活化则是脊髓炎症反应过程中的关键环节。小胶质细胞表面表达丰富的跨膜受体蛋白Toll样受体4(TLR4),并且通过TLR4识别各种配体激活下游的信号通路,释放炎性因子,介导脊髓炎症反应,引起脊髓继发性损伤。近年来,许多人致力于骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗脊髓损伤的研究,大量研究表明,BMSCs移植能够有效减轻脊髓损伤,促进神经功能修复,已经证实的作用机制包括营养作用、替代作用、桥接作用、诱导作用等。有研究发现BMSCs能够通过抑制肺组织TLR4的表达以减轻肺损伤,然而有关BMSCs对介导脊髓炎症的TLR4信号通路影响的报道较少。本实验通过建立大鼠脊髓损伤模型并静脉移植BMSCs,研究BMSCs移植对损伤脊髓TLR4表达的影响,探讨BMSCs移植可能通过哪些机制减轻脊髓炎症反应、治疗脊髓损伤。研究目的：验证大鼠BMSCs体外培养及鉴定的方法,研究脊髓损伤大鼠进行BMSCs移植后TLR4表达的变化,探讨BMSCs移植可能通过哪些机制治疗脊髓损伤。研究方法：取4周龄雄性Wistar大鼠分离股骨及胫骨骨髓并在体外培养BMSCs,观察细胞生长形态并鉴定第3代BMSCs,收集备用。取8周龄雄性Wistar大鼠90只,随机分为3组,每组30只,分别是假手术对照组、脊髓损伤组和细胞移植组,脊髓损伤组用Allen’s打击器建立脊髓损伤模型,细胞移植组建立脊髓损伤模型后尾静脉移植BMSCs.分别于术后24h、72h、7d将实验大鼠处死,获取损伤中心长约1cm的脊髓段,分别应用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测脊髓组织TLR4的表达。研究结果：BMSCs体外培养生长良好,大部分为长梭形,免疫细胞化学染色显示CD44染色阳性,呈棕黄色,CD34染色阴性。免疫组化和实时荧光定量PCR结果显示：假手术对照组TLR4表达在三个时间点无明显变化,脊髓损伤组和细胞移植组TLR4表达在三个时间点先升高,后回落；在相同时间点脊髓损伤组TLR4表达比假手术对照组增加(P<0.05),细胞移植组TLR4表达比脊髓损伤组降低(P<0.05)。研究结论：1.大鼠BMSCs能够在体外培养并鉴定。2.大鼠脊髓损伤后损伤处TLR4表达增高,BMSCs移植后TLR4表达降低。3.大鼠BMSCs可能通过降低损伤处TLR4的表达抑制脊髓损伤后的炎症反应、治疗脊髓损伤。