螺旋藻抗氧化多肽的制备及活性研究

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螺旋藻(spirulina)属于蓝藻门、颤藻科中的一个属,含有多种营养成分,其中蛋白质含量高达60%~70%,并含有各种维生素、微量元素和必需氨基酸,具有营养及医疗保健功能,成为近年来开发利用的营养价值最高的天然食品。本研究利用酶解法制备螺旋藻抗氧化多肽,该技术直接利用蛋白酶降解蛋白质,以蛋白质水解度和抗氧化能力为评价标准对酶解用酶进行了初步的筛选,根据中心组合试验设计原理,在单因素试验的基础上,以水解度为响应值,利用响应面法对影响螺旋藻蛋白水解的各种影响因素如温度、pH、酶解时间和加酶量进行了系统研究,得到最佳工艺条件为:pH=7、反应温度55℃、酶解时间160min、酶底比4300U/g,水解度可达到26.69%。本实验采用体外抗氧化评价机制:包括DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、亚铁还原能力等对酶解多肽产物的抗氧化活性进行测定评价,发现其比BHT、抗坏血酸等合成抗氧化剂具有更有效的自由基清除能力。本实验采用超滤法将Alcalase对螺旋藻蛋白水解160min的水解产物分成分子量大于5000Da和分子量小于5000Da两个部分,采用SephadexG-25凝胶柱层析对小于5000Da的组分进行进一步的纯化,实验证明在307Da~1450Da范围的螺旋藻小分子肽为水解物中抗氧化能力最强的成分,这为进一步纯化鉴定出具有抗氧化生理功能的生物活性肽奠定基础。
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