1.目的野菊花是菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L.)的干燥头状花序,其主要药理活性成分为总黄酮,具有清热解毒、降血压、抗病毒、抑制血小板凝聚等功能。野菊花是金菊粉针剂的主要药效成分,但是目前还不能说明其抗病毒的有效组分。本课题是旨在以总黄酮含量为指标找到野菊花的有效部位,然后对其有效部位的化学成分进行研究,从而为找到其药效组分奠定基础。2.方法及研究思路(1)研究方法1)采用正交试验的方法对野菊花总黄酮提取、富集工艺进行研究。2)采用现代色谱分离手段对有效组分的化合物进行分离、纯化。3)采用波谱和质谱法对化合物的结构进行鉴定。(2)技术路线野菊花水提取物富集总黄酮确定有效组分有效组分的化学单体分离、纯化化合物的结构鉴定3.内容第一部分:中药野菊花的化学成分研究、药理学研究进展综述第二部分:野菊花总黄酮富集工艺研究第三部分:野菊花有效部位化学组分的提取、分离和结构鉴定第四部分:总结与讨论4.结果(1)以野菊花总黄酮含量为指标,筛选其水提物的有效部位,最终确定的工艺流程为:野菊花用水提取3次,溶剂用量依次为10、10、10倍,提取温度100°C,提取时间为50,40,30min,水提液用80%乙醇醇沉后药液上大孔树脂柱,弃去水洗液和10%乙醇洗脱液,收集30%乙醇洗脱液,其中30%乙醇洗脱液就是最后我们得到的野菊花水提取物的有效部位。(2)利用现代色谱分离手段和波谱技术,对其有效部位进行化学成分研究,从中分离得到了13个单体化合物,利用波谱法和质谱法鉴定了其中11个化合物的结构,其中黄酮苷4个,即异槲皮苷(化合物3)、木犀草苷(化合物4)、秋英苷(化合物5)、蒙花苷(化合物6);游离黄酮3个,分别为圣草酚(化合物7)、木犀草素(化合物8)、槲皮素(化合物9);倍半萜化合物2个,为野菊花三醇A(化合物1)和野菊花四醇(化合物2);甾体1个,即胡萝卜苷(化合物11),还有一个为浙贝素(化合物10)。其中野菊花三醇A和野菊花四醇经文献检索为新化合物。3个为首次从该植物中分离得到,它们分别为异槲皮苷、圣草酚、浙贝素。5.结论及创新点(1)首次提出AB-8大孔树脂对野菊花的总黄酮进行富集的工艺。该工艺的优点是:大孔吸附树脂对总黄酮吸附效果较好,大孔树脂法富集野菊花总黄酮具有收率高,成本低,有机溶媒用量小,操作简便,工艺稳定,方法可行,可供大生产选用。(2)确定了野菊花水提取物药效组分中的11个化合物,初步确定其有效部位的药效组分的化合物特征为:黄酮类-萜类-木脂素衍生物类-甾体类,提出了其化学药效组分的质量评价的基本特征。(3)首次从野菊花中分离得到5个化合物,其中2个为新化合物,分别为:野菊花三醇A和野菊花四醇。6.讨论及展望野菊花水提取物中的药效组分大多数为黄酮类化合物,证明了其主要药效组分为黄酮类。有人从野菊花中分离得到过倍半萜类成分-野菊花醇,并且已经证明其有非常好的抗炎、抗病毒的药理活性,所以本次研究得到的新的倍半萜类成分野菊花三醇A和野菊花四醇是否具有抗病毒的活性,非常值得我们去进一步来研究。中药质量的评价应以组分去评价,这样可以客观地表述其本质特征。