来安花红茎段组织培养研究

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来安花红(Malus asiatica),属蔷薇科(Rosaceae),苹果属(Malus),落叶小乔木,为花果并美的观赏树木之一。来安花红含有对人体有益的多种维生素和矿物质,营养价值丰富。目前,国内对来安花红的组织培养的研究还没有,多采用嫁接方式,繁殖系数低,不能满足生产的需求,严重限制了来安花红苗木的发展。本文针对来安花红的组织培养进行研究,初步探索提高来安花红繁殖数量和质量的有效途径。采用组培技术手段,应用正交设计法,以来安花红的茎段为外植体,通过建立外植体无菌体系,芽诱导、增殖,进而生根,来达到快速繁殖的目的,主要结论如下:1以来安花红的茎段为外植体,发现来安花红水培外植体的最佳消毒方法为70%酒精30s+0.1%氯化汞4min,野外采集的外植体为70%酒精30s+0.1%氯化汞7min。2来安花红2月份水培的外植体污染率和褐化率均很低,分别为13.33%、14.44%,其无菌成活率最高,为72.22%。2月份为最佳采植时间。3幼嫩茎段、半木质化茎段、木质化茎段其无菌成活率分别为65.56%、70.00%、42.22%,由此可以看出,同一灭菌处理对来安花红不同外植体部位灭菌的效果:半木质化茎段>幼嫩茎段>木质化茎段。4采用每7d转移到新鲜的培养基的方式最佳,褐变率减少至13.33%。其次是在培养基中添加活性炭,外植体的褐化率减少为18.89%,而PVP的作用不是非常明显,褐化率仍有20%。5三种外植体对芽诱导启动的效果:半木质化的茎段>幼嫩茎段>木质化茎段。半木质化的茎段芽萌发最快,只需7-12天,且芽生长健壮。6采用正交设计,发现基本培养基对芽诱导的影响最大,其次是6-BA,NAA的影响最小,最适培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.3mg/L。7采用正交设计,发现影响增殖系数的主要因素是6-BA,NAA次之,且6-BA在0.01水平上差异显著,得出最佳的增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.25mg/L。8本试验没有获得来安花红的生根试管苗,究其原因可能有以下几点:第一,生长素用量不当;第二,组培苗质量不同;第三,生根诱导的基本培养基不适;第四,品种生根性能的影响。
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