5-aza-CdR对HepG2细胞中Bax和Akt表达的影响

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目的:观察5-aza-CdR对HepG2细胞增殖及Bax基因表达的影响,并探讨其与Akt表达的相关性,为肝癌的防治提供理论依据。方法:取浓度分别为0μmol/L、0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L和102.4μmol/L的5-aza-CdR处理HepG2细胞,5-aza-CdR作用24h、48h和72h后,用相差显微镜观察不同药物浓度和时间段的HepG2细胞形态学改变;采用MTT法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的增殖抑制率;采用RT-PCR法和Westernblot法检测5-Aza-CdR对Akt、Bax mRNA和蛋白表达的影响。结果:1、 MTT法检测结果显示,与对照组比较,5-aza-CdR处理组的HepG2细胞增殖抑制率显著性增加,呈时间和浓度依赖性(均P<0.05);HepG2细胞经0μmol/L、0.4μmol/L、1.6μmol/L、6.4μmol/L、25.6μmol/L、102.4μmol/L的5-aza-CdR处理72h后,细胞增殖抑制率分别为0.7%、41.5%、48.8%、56.4%、64.8%、69.0%,(均P<0.05)。2、RT-PCR法检测结果显示5-aza-CdR以浓度和时间依赖的方式上调了BaxmRNA的表达,同时下调Akt mRNA的表达(均P<0.05)。3、Western blot法检测结果显示5-aza-CdR同样以浓度和时间依赖的方式上调Bax蛋白的表达,下调Akt蛋白的表达(均P<0.05)。结论:5-aza-CdR抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与5-aza-CdR下调Akt及上调Bax表达有关。
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