芽休眠是植物抵御不良生长环境的一种重要适应策略,在多年生植物年生长周期中发挥重要作用。中国绝大多数茶区冬季都会经历较长时间的低温,芽休眠的形成关系到茶树安全越冬,而休眠解除的时间则影响春季芽萌发的早晚,因此深入解析参与茶树芽休眠关键作用因子的调控机制对探明茶树冬季休眠的作用机理,推动分子辅助育种在茶树品种选育中的应用有重要意义。DAM是在桃无休眠突变株中鉴定的直接参与休眠调控的重要基因,前期研究表明该基因可能在调控茶树越冬芽休眠形成及解除过程中同样发挥重要作用。本文以CsDAM基因为研究对象,以期通过基因结构、组织表达及序列多态性分析、目的基因可能的下游关键基因的克隆及表达分析,进一步揭示茶树休眠的调控机理。主要结果如下:1.克隆、研究了CsDAM1和CsDAM2基因的结构、亚细胞定位及组织表达特异性。发现:两个基因均由8个外显子和7个内含子组成,但是基因长度和序列相似性存在明显差异。启动子序列分析表明CsDAMs基因可能主要受光信号、激素和胁迫刺激调控。二者编码蛋白均定位于细胞核。CsDAM1和CsDAM2在叶片、腋芽和根中有着较高的表达丰度,顶芽和茎次之,在花中的表达最低。2.基于过表达CsDAM1的杨树转录组分析,在差异表达的转录本中鉴定出一条在植物生长发育调控中发挥重要作用的AIL基因。同源比对后,从茶树转录组中筛选出CsAIL基因。利用同源克隆技术,在茶树上克隆了其同源基因CsAIL。CsAIL ORF长1 872 bp,在顶芽、腋芽、茎中的表达量较高,叶片中的表达量较低,花中基本不表达;启动子可能受光照、激素和非生物胁迫调控。CsAIL及其可能的下游靶基因CsCYCD3.2和CsCYCD6.1在越冬芽生理休眠期表达量最低,在生态休眠期表达量最高,在萌动期表达量较高,CsAIL与CsCYCD3.2、CsCYCD6.1的表达在芽和叶中均存在显著正相关(P<0.01),表明,CsAIL可能是参与茶树休眠调控的关键基因,与CsCYCDs共同在茶树年休眠—生长循环中发挥作用。3.CsDAM1基因与茶树芽休眠解除的时间早晚关系较密切,该基因可作为茶树萌发物候的早期鉴定指标。不同物候期品种的基因表达分析发现,CsDAM1在休眠形成和解除过程中表达水平先升至最高后迅速下调,该基因在早生茶树品种越冬芽萌发阶段的表达量下调到低值的时间早于晚生品种,而CsDAM2并没有明显关联;人工休眠诱导条件下:两个基因表达水平变化不显著。CsDAM1基因在不同萌发物候茶树品种间存在多个位点的单碱基突变,且存在部分小片段的插入和缺失。以上结果表明,CsDAM1在不同萌发物候茶树休眠形成和解除调控中可能发挥更重要的作用。