芹叶铁线莲杀虫活性成分研究

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芹叶铁线莲Clematis aethusifolia Turcz.为毛茛科Ranunculacea铁线莲属多年生草质藤本。该属植物资源比较丰富,在全国范围内均有分布,其中西南地区较多。该属植物大部分均可入药,具有祛风除湿、舒筋活血、消肿止痛的药理作用。到目前为止,有不少学者从铁线莲属植物中分离到了皂苷、黄酮、香豆素、木脂素、生物碱、酚性成分等多种类型的化合物。本研究对芹叶铁线莲的杀虫活性物质进行追踪分离、结构鉴定及杀虫活性研究,取得如下结果:1.利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相柱色谱以及半制备高效液相色谱等不同的分离技术,从芹叶铁线莲的乙醇提取部分分离得到了10个化合物,通过分析所得化合物的理化性质和波谱数据,对分离得到的单体化合物进行了结构鉴定,分别是三个木脂素类化合物:(+)-丁香脂素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖(TQ-1)、(+)-松脂素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(TQ-3)和Samsesquinoside(TQ-4),三个黄酮类化合物:槲皮素(TQ-2)、槲皮素-3-芸香糖苷(TQ-7)和槲皮素-7-葡萄糖苷(TQ-8),以及四个皂苷类化合物:(3-O-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤苷)(Clematoside S,TQ-5)、3-O-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-β-D-吡喃木糖-常春藤苷(Clematilasiandroside A,TQ-6)、(3-O-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(Clematichinenoside A,TQ-9)、(3-O-β-D-吡喃核糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖-齐墩果酸-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷)(Huzhangoside C,TQ-10)。2.采用叶碟法和小叶碟添加法分别测定了4种单体化合物TQ-5、TQ-6、TQ-9和TQ-10在1000μg/m L浓度下对小菜蛾Plutella xylostella(L)以及粘虫Mythimna separata(walker)3龄幼虫的拒食以及胃毒活性。结果显示:化合物TQ-5和TQ-6对小菜蛾具有较好的的拒食活性以及一定的胃毒活性,48 h的拒食率分别为65.32%和63.08%,72 h的死亡率分别为33.33%和33.33%。3.采用叶碟法测定了单体化合物TQ-5和TQ-6对小菜蛾P.xylostella 3龄幼虫的精密拒食及胃毒活性。结果显示:TQ-5对小菜蛾3龄幼虫24 h和48 h的拒食中浓度AFC50分别为737.67和748.28μg/m L,48 h和72 h的致死中浓度LC50为分别为1789.03和1462.78μg/m L;TQ-6对小菜蛾三龄幼虫24h和48h的拒食中浓度AFC50分别为884.77和744.24μg/m L,48 h和72 h的致死中浓度LC50为分别为2152.51和1652.15μg/m L。4.测定了TQ-5对小菜蛾P.xylostella 3龄幼虫生长发育的影响。结果显示,不同浓度(500、1000、1500μg/m L)的TQ-5处理均可抑制小菜蛾幼虫的生长发育:与对照相比,处理后的小菜蛾试虫体重以及蛹重降低,化蛹及羽化时间有所延长,化蛹率及羽化率降低,随着药剂浓度的增大,试虫生长受抑程度增强。以上研究结果阐明了芹叶铁线莲中皂苷类次生代谢产物的杀虫活性物质基础,为进一步研究铁线莲属皂苷类化合物对鳞翅目害虫的杀虫作用机理奠定了基础。
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