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本文主要关注嗜碱L-乳酸菌的筛选和所筛菌株的发酵条件优化,具体研究如下:⑴建立了利用HPLC检测嗜碱菌株发酵液中有机酸的方法。采用AminexHPX-87H Ion Exclusion Column(300 mm×7.8 mm),流动相为18 mM硫酸溶液,流速0.5 ml/min,柱温60℃,进样量10μl,二极管阵列检测器,检测波长215 nm。在此条件下,十种有机酸能够得到很好的分离。利用HPLC检测483株嗜碱菌的发酵液,筛选得到6株高产L-乳酸的菌株。⑵对6株L-乳酸高产菌株中生长最快,产酸最快最多的菌株WL-S20进行发酵条件优化。确定了菌株WL-S20发酵生产L-乳酸的最佳溶氧条件是转速200rpm,前12 h通气0.51pm,然后停止通气直到发酵结束;最佳pH条件为pH9.0;最佳温度条件为45℃。⑶对菌株WL-S20发酵生产L-乳酸的接种条件进行了优化,确定种子液最佳培养温度40℃,最佳种龄8h,最佳接种量10%。⑷优化得到菌株WL-S20发酵生产L-乳酸的最佳发酵培养基(g/1):葡萄糖80.0,花生粕20.0,MgSO4·7H2O0.35,K2HPO4·3H2O2,CH3COONa1,MnSO4·H2O0.03,NaCl20。⑸对菌株WL-S20进行了多次脉冲补料发酵研究:L-乳酸终浓度为225 g/l,糖酸转化率为99.3%,未检测到D-乳酸。对菌株WL-S20进行了单次补料发酵研究:L-乳酸终浓度为180 g/l,糖酸转化率为98.6%,未检测到D-乳酸。嗜碱菌株WL-S20发酵生产的L-乳酸产量、糖酸转化率和光学纯度都很高,且发酵过程清洁,发酵氮源廉价,在工业应用上具有一定的潜力。