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目的:运用蛋白免疫印迹实验(Western Blot)、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)、Quantitative Dot Blot analysis(QDB)技术分别检测 IKBKE 在结直肠癌组织中的表达,并对癌组织及癌旁组织、转移组癌组织及未转移组癌组织中的表达情况进行比较分析,探讨不同检测技术在组织蛋白表达相关研究中的应用。方法:收集2017年6月—2017年12月在滨州医学院烟台附院病理科确诊的结直肠癌患者的石蜡包埋组织30例。所有石蜡包埋组织切片均有完整的临床资料及病理资料,所有患者在术前均未接受过任何治疗、均证实为原发性结直肠癌、其他部位无原发性癌、术式均为结直肠癌根治术且肠系膜检出淋巴结数均≥15枚。由2位副高以上职称诊断医师对30例样本重新进行阅片,根据淋巴结转移情况分为未转移组(n=o)、转移组(n≥1),其中未转移组12例、转移组18例,选取肿瘤组织及其癌旁石蜡包埋组织(距离肿瘤组织约2 cm处正常组织)。分别提取肿瘤组织和癌旁组织中的蛋白质,运用Western Blot检测部分肿瘤组织和癌旁组织中内参蛋白的表达情况,利用离散系数对检测结果进行分析。同时应用免疫组化和QDB技术分别检测肿瘤组织及癌旁组织中IKBKE的含量,进行分析,进一步分析转移组和未转移组癌组织中IKBKE的表达,应用t检验分别对两组检测结果进行统计学分析。结果:1、在石蜡包埋组织提取的蛋白中,相同蛋白量的组织其内参蛋白(β-tublin及β-actin)的表达差异较大,离散系数均>15%(β-tublin为19%,β-actin为34%)。2、免疫组化检测显示IKBKE在结直肠癌组织中表达高于癌旁组织中的表达,差异具有统计学意义(P<0.001),IKBKE在转移组癌组织中的表达与未转移组癌中的表达无明显差异(P>0.05)。3、QDB检测显示IKBKE结直肠癌组织中的表达高于对应癌旁组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05),IKBKE在转移组中的表达明显高于未转移组的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1、石蜡包埋组织提取蛋白内参的表达差异较大,不适合Western Blot的检测。2、免疫组化能够对目的蛋白准确定位,但是对蛋白表达多是半定量,判断具有主观性。3、QDB技术是一种高通量、检测结果更加客观的蛋白检测方法,相较于免疫组化,能够做到更准确定量。