紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制物的提取鉴定及生物活性研究

来源 :中北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shqcd992
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)是降低人体内尿酸含量的重要靶点。从天然产物中筛选出效果佳、毒副作用低的新型黄嘌呤氧化酶抑制物在治愈痛风及高尿酸血症方面具有重大意义。紫苏(Perilla frutescens(L.)Britt.),属一年生草本植物,被中国卫生部列为药食两用植物。其中,紫苏叶不仅可用于食品、化妆品等领域,还可用于治疗多种疾病。因此,本文以紫苏叶为原料,确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,研究紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制物的提取和纯化工艺,并进一步探究其抗氧化活性和抑菌活性。主要研究结果如下:(1)建立紫外分光光度法测定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶活性抑制效果的检测体系。通过酶抑制作用及抑制动力学分析,确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用类型为竞争性可逆抑制,与别嘌呤醇相同,且其对黄嘌呤氧化酶的IC50为5.80mg/mL,抑制动力学常数Ki为2.19mg/mL。采用该检测体系,分别对24种紫苏及5个生长时期采集的紫苏叶进行筛选,结果表明,最佳叶片采集时期为苗期,最佳紫苏品种为ZY7。(2)采用响应面法优化紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制物提取工艺。通过超声辅助提取法,考察原料粒径、超声时间、乙醇浓度、提取温度、超声功率和料液比6个因素对紫苏叶提取物抑制率的影响。以单因素试验为基础,采用响应面法对提取工艺进行优化,得到最优提取工艺为:超声时间18min,乙醇浓度48%,提取温度40℃,料液比1:30。在此条件下,紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率为68.71%。(3)有机溶剂萃取和大孔树脂纯化相结合,进一步分离纯化紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制成分。将紫苏叶50%乙醇提取物分别在石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇中进行萃取,试验结果表明,正丁醇萃取物对黄嘌呤氧化酶的抑制效果最佳,其抑制率为69.14%。通过静态吸附-解析实验,筛选出NKA-9型大孔树脂为最佳纯化树脂类型,该树脂的静态吸附率为83.27%,解析率为83.41%,最佳吸附平衡时间为9.0h,解析平衡时间为3.5h,上样液pH为6.0。通过动态吸附-洗脱实验,确定其最佳纯化工艺为:上样液浓度15mg/mL,上样流速3BV/h,乙醇体积分数60%,洗脱流速2BV/h。经过纯化,紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物对黄嘌呤氧化酶的抑制率从68.52%上升到80.86%。对纯化后的样品进行HPLC-MS分析,初步鉴定出4种主要化合物,分别为芹菜素-7-O-二葡萄糖苷酸,木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷,黄芩苷和7-羟基香豆素。(4)采用清除ABTS+自由基、清除DPPH自由基、清除羟基自由基、铁离子还原能力(FRAP)和清除超氧阴离子能力五种模型对Vc及紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物纯品、粗品抗氧化性进行研究。结果显示,三种样品清除ABTS+自由基IC50值分别为0.220、0.558和0.771mg/mL,清除DPPH自由基IC50值分别为0.449、0.945和3.518mg/mL;清除超氧阴离子IC50值分别为0.473、0.703和0.890mg/mL,在以上三种模型中,清除能力均为:Vc>纯品>粗品;在铁离子还原能力(FRAP)模型中,纯品的FRAP值也明显高于粗品;而在清除羟基自由基模型中,清除能力Vc>粗品>纯品,其IC50值分别为1.559、2.231和1.896mg/mL。同时,紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌能力测定结果表明,其对三种供试菌种的最小抑菌浓度分别为2.5、0.3125、1.25mg/mL。
其他文献
目的探讨腹腔镜胆囊切除术(Laparoscopic cholecystectomy,LC)胆管损伤发生的原因、诊断及处理方法.方法回顾性分析我院收治的12例LC胆管损伤的临床资料.结果本组病例中LC术
1998-2002年,我国各部门、各地方认真落实<中华人民共和国减灾规划(1998-2010年)>,加大了减灾投入.国务院副总理、中国国际减灾委员会主任回良玉在2003年8月13日召开的减灾委
光电效应,是指在光照射下时材料电学性质发生变化的现象,根据不同的光照及工作方式又可分为纵向光电效应和侧向光伏效应,它们分别在光电探测器和光位置灵敏探测器中具有广泛应用和研究。Bi_2Te_3作为一种宽频带光电探测的理想材料,具有带隙较窄,光吸收系数强等特点,一直是科学家们在光电器件研究的热门材料之一,但是局限在传统的光电探测器中,对其侧向光伏效应及光位置灵敏探测器方面的研究和报道极少。本文以Bi_
现代认知心理学家认为,问题解决的过程分为四个阶段,具体为问题表征、形成问题解决策略、执行问题解决策略以及回顾与评价。而问题表征作为第一步,可想而知其占据极其重要的
大学生的道德行为尤其是利他行为的表现及发展规律一直是高校思想政治教育研究的重点。之前大部分的研究是从社会环境、学校教育等宏观层面探讨大学生道德行为受何种因素影响,很少有对微观层面的研究,这其中就包含了家庭教养方式。所以,探究大学生的利他行为倾向是否会受到家庭教养方式的影响,不仅可以对习近平总书记关于家风家教的重要思想进行深入的论证,而且还可以丰富大学生思想政治教育的理论体系,更加全面地理解和把握大
本文以材料成型及控制工程专业大学生为例,介绍了材料成型及控制工程专业(铸造方向)大学生的知识教育现状,评述了铸造专业学生参加“全国大学生铸造工艺设计大赛”对实践能力培养
在电子不停车收费站,由于跟车干扰带来的逃费现象给高速公路管理方造成巨大的经济损失.过去常采用调整路侧单元通信区域的方法来降低发生跟车干扰的概率,同时也降低了车辆的
魔芋葡甘露聚糖(KGM)具有丰富的食用价值和良好的保健功效,将KGM添加到小麦粉中制得面团制品,可以增加膳食纤维类多糖,改善面团的品质。本文阐释了KGM与淀粉、面筋蛋白的作用
社会治安复杂化、防控体系不健全、现行警务机制不完善,是影响控案的主要因素。对此,诸暨市公安局从破解主观因素着手,弱化客观因素带来的障碍,通过搭建专项平台、狠抓专业队
近年来随着一系列鼓励兼并重组文件的发布,越来越多的企业通过兼并和收购的方式扩大规模或整合产业,由此掀起一阵并购浪潮。但与此同时,业绩承诺无法实现、并购方计提大额商