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黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XOD)是降低人体内尿酸含量的重要靶点。从天然产物中筛选出效果佳、毒副作用低的新型黄嘌呤氧化酶抑制物在治愈痛风及高尿酸血症方面具有重大意义。紫苏(Perilla frutescens(L.)Britt.),属一年生草本植物,被中国卫生部列为药食两用植物。其中,紫苏叶不仅可用于食品、化妆品等领域,还可用于治疗多种疾病。因此,本文以紫苏叶为原料,确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,研究紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制物的提取和纯化工艺,并进一步探究其抗氧化活性和抑菌活性。主要研究结果如下:(1)建立紫外分光光度法测定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶活性抑制效果的检测体系。通过酶抑制作用及抑制动力学分析,确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用类型为竞争性可逆抑制,与别嘌呤醇相同,且其对黄嘌呤氧化酶的IC50为5.80mg/mL,抑制动力学常数Ki为2.19mg/mL。采用该检测体系,分别对24种紫苏及5个生长时期采集的紫苏叶进行筛选,结果表明,最佳叶片采集时期为苗期,最佳紫苏品种为ZY7。(2)采用响应面法优化紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制物提取工艺。通过超声辅助提取法,考察原料粒径、超声时间、乙醇浓度、提取温度、超声功率和料液比6个因素对紫苏叶提取物抑制率的影响。以单因素试验为基础,采用响应面法对提取工艺进行优化,得到最优提取工艺为:超声时间18min,乙醇浓度48%,提取温度40℃,料液比1:30。在此条件下,紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率为68.71%。(3)有机溶剂萃取和大孔树脂纯化相结合,进一步分离纯化紫苏叶中黄嘌呤氧化酶抑制成分。将紫苏叶50%乙醇提取物分别在石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇中进行萃取,试验结果表明,正丁醇萃取物对黄嘌呤氧化酶的抑制效果最佳,其抑制率为69.14%。通过静态吸附-解析实验,筛选出NKA-9型大孔树脂为最佳纯化树脂类型,该树脂的静态吸附率为83.27%,解析率为83.41%,最佳吸附平衡时间为9.0h,解析平衡时间为3.5h,上样液pH为6.0。通过动态吸附-洗脱实验,确定其最佳纯化工艺为:上样液浓度15mg/mL,上样流速3BV/h,乙醇体积分数60%,洗脱流速2BV/h。经过纯化,紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物对黄嘌呤氧化酶的抑制率从68.52%上升到80.86%。对纯化后的样品进行HPLC-MS分析,初步鉴定出4种主要化合物,分别为芹菜素-7-O-二葡萄糖苷酸,木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷,黄芩苷和7-羟基香豆素。(4)采用清除ABTS+自由基、清除DPPH自由基、清除羟基自由基、铁离子还原能力(FRAP)和清除超氧阴离子能力五种模型对Vc及紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物纯品、粗品抗氧化性进行研究。结果显示,三种样品清除ABTS+自由基IC50值分别为0.220、0.558和0.771mg/mL,清除DPPH自由基IC50值分别为0.449、0.945和3.518mg/mL;清除超氧阴离子IC50值分别为0.473、0.703和0.890mg/mL,在以上三种模型中,清除能力均为:Vc>纯品>粗品;在铁离子还原能力(FRAP)模型中,纯品的FRAP值也明显高于粗品;而在清除羟基自由基模型中,清除能力Vc>粗品>纯品,其IC50值分别为1.559、2.231和1.896mg/mL。同时,紫苏叶黄嘌呤氧化酶抑制物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌能力测定结果表明,其对三种供试菌种的最小抑菌浓度分别为2.5、0.3125、1.25mg/mL。