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人工栽培灵芝与野生灵芝生理活性存在很大差异,究其因为主要是培养基质与生长环境条件存在很大差距。其中最主要的差异是野生灵芝宿主是植物,植物都含特定的活性成分,为了揭示这些植物活性成分对灵芝成分与功能的影响,本文在液体培养基质和固体培养基质中添加中药,研究了中药活性成分与灵芝在两种基质中的相互作用,以及液体培养基组成对青蒿活性成分与灵芝相互作用的影响。主要结论如下:
首先,在液体培养中分别添加不同浓度的干姜、青蒿、黄连、苦参、槐米花、何首乌、葛根、山药粉末,根据生物量值确定中药添加量,结果显示最佳中药添加量干姜、青蒿、黄连为2 g/L,苦参、槐米花为5 g/L,何首乌、葛根、山药为8 g/L。在中药的最适剂量下,分析菌丝体成分、清除自由基及抗氧化能力。实验结果表明,与对照组相比较,槐米花、青蒿、干姜、山药对菌丝体中黄酮、三萜、皂甙含量具有良好的促进作用,其他几种具有抑制作用,说明灵芝菌丝体对同一种中药的不同成分、不同中药的同一成分的富集作用具有差异,中药对灵芝菌丝体代谢具有调节作用。中药培养的灵芝菌丝体醇提物体外清除自由基、抗氧化活性能力不同,同种中药培养的菌丝体体外自由基清除率、抗氧化活性大小也不同,说明中草药活性成分对菌丝体的功能具有影响作用。
其次,在最适剂量下,对固体栽培的灵芝子实体进行分析,也得到类似的结果,说明灵芝子实体对不同中药的不同成分、不同中药的同种成分的富集作用不同,不同中药对灵芝子实体的代谢调节作用不同;添加不同中药培养的灵芝子实体体外清除自由基与抗氧化能力不同,同种中药培养的子实体体外自由基清除率及抗氧化活性大小也不同。表明了中草药活性成分对子实体的活性成分含量、功能具有影响作用。
最后,在前面实验基础上,进一步探讨了培养基质对中药青蒿与灵芝在液体培养条件下相互作用的影响,结果显示不同碳源、氮源、无机盐以及营养因子对灵芝菌丝体与青蒿的作用效果有显著影响。获得灵芝与青蒿最大作用效果优化培养基质:40 g/L葡糖糖、8 g/L酵母膏、0.5 g/L氯化锌、0.3 g/L钼酸钠,0.2g/L3,5-二硝基水杨酸、0.2g/L维生素B1、0.3 g/L维生素C。