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目的通过体外实验研究探讨非诺贝特对人视网膜色素上皮细胞(RPE)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活力的影响及可能的机制,通过体内实验探讨激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管形成过程中脉络膜和视网膜内VEGFC和VEGFR-3的表达变化规律及非诺贝特对脉络膜新生血管发生发展的影响作用,为眼脉络膜新生血管性相关疾病提供新的思路。方法1.将RPE和HUVEC细胞分组：RPE正常组,RPE+非诺贝特组,RPE缺氧组,RPE缺氧+非诺贝特组；HUVEC细胞正常组,]HUVEC+缺氧上清组；将健康成年BN大鼠随机分成空白对照组和实验组,实验组分为非诺贝特干预组(用药组),非干预组(实验对照组),每组以1w、2w、3w和4w为观察点。2.用超氧化物阴离子探针检测RPE缺氧情况,MTT检测细胞活力,ELISA检测RPE细胞培养液上清中VEGFC和VEGFR-3的表达；细胞划痕实验检测细胞迁移能力,细胞管腔形成实验检测]HUVEC细胞的血管形成能力,qRT-PCR和Western-blot检测RPE细胞VEGFC和VEGFR-3的mRNA和蛋白质的表达水平；用FFA检测非诺贝特干预组和非干预组激光斑处不同时间点脉络膜新生血管的渗漏面积和渗漏强度,用凝聚素B4染脉络膜铺片观察激光斑处不同时间点新生血管内皮细胞的染色程度,行BN大鼠眼球冰冻切片,用免疫荧光化学检测激光斑处脉络膜和视网膜VEGFC和VEGFR-3的分布情况,用qRT-PCR技术定量检测不同时间点各组脉络膜和视网膜内VEGFC和VEGFR-3的mRNA表达变化,用Western Blot技术,检测不同时间点各组脉络膜和视网膜内VEGFC和VEGFR-3的蛋白质表达变化。结果1.非诺贝特能抑制因缺氧引起的RPE细胞内和培养液上清中VEGFC和VEGFR-3表达上调；2.缺氧培养RPE细胞上清液可促进HUVEC细胞活力增加,细胞迁移数增多,管腔形成数增多,而非诺贝特能抑制这一过程；3.激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管形成后,脉络膜和视网膜内均可以发现有VEGFC和VEGFR-3的表达,其中VEGFC主要表达于激光斑上方视网膜神经节细胞层内,VEGFR-3主要表达与脉络膜激光斑处的新生血管区域,正常的脉络膜和视网膜未发现有上诉两种因子的表达；4.激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管形成后,脉络膜和视网膜表达的VEGFC和VEGFR-3呈现一定的规律性,在脉络膜和视网膜中VEGFC表达随时间的推移呈现逐渐下调的趋势,在脉络膜中VEGFR-3的表达呈现逐渐升高并持续维持于高表达水平,在视网膜中VEGFR-3基本不表达或仅有少量表达；5.非诺贝特能够明显下调激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管形成和发展过程,其能够明显下调视网膜和脉络膜内VEGFC的表达量,脉络膜内的VEGFR-3的表达下调与非诺贝特下调VEGFC的表达量有关。结论1.CoCl2诱导体外培养的RPE细胞缺氧导致VEGFC和VEGFR-3表达上调,非诺贝特能够抑制RPE细胞缺氧状态下VEGFC和VEGFR-3的表达上调；2.RPE缺氧后的细胞培养上清液中的VEGFC和VEGFR-3浓度上升,上清液对HUVEC细胞具有促增殖、迁移和毛细血管成管活性的作用,提示RPE细胞在缺氧导致的CNV形成过程中起到了重要的作用,非诺贝特能够抑制RPE细胞缺氧后的VEGFC和VEGFR-3的上调,从而有可能通过调节RPE的功能活性来间接影响HUVEC细胞的活性从而达到抑制新生血管的形成。3.VEGFC主要表达于BN大鼠激光损伤区域上方的视网膜神经节细胞层内,VEGFR-3主要表达于激光斑处的脉络膜损伤区；4.非诺贝特能够下调脉络膜和视网膜内VEGFC的表达,对脉络膜内VEGFR-3的下调作用可能是通过VEGFC的间接影响。